CAJ | 학술논문

以质粒pACYC184为材料,研究了松材线虫携带的荧光假单胞菌的最适电转化条件.结果表明,荧光假单胞菌GcM5-1A培养至D600nm为0.5时制备感受态细胞,以300 mmol/L蔗糖溶液为电击缓冲液,质粒DNA终浓度为0.01 ng/μL,在25 μF电容、9 kV/cm电场强度、200 Ω电阻的电击条件下电击一次,可得最大的电转化效率,即5.5×106/μg(DNA).SDS-PAGE分析显示,转化质粒pACYC184的氯霉素抗性基因在受体细胞内得到了表达.本方法的建立为松材线虫携带的荧光假单胞菌的基因导入提供技术支持.为进一步通过基因敲除的方法,选择性地失活特定功能基因,进而确定这些基因在松材线虫病病理进程中的作用奠定基础.图2参16
이질립pACYC184위재료,연구료송재선충휴대적형광가단포균적최괄전전화조건.결과표명,형광가단포균GcM5-1A배양지D600nm위0.5시제비감수태세포,이300 mmol/L자당용액위전격완충액,질립DNA종농도위0.01 ng/μL,재25 μF전용、9 kV/cm전장강도、200 Ω전조적전격조건하전격일차,가득최대적전전화효솔,즉5.5×106/μg(DNA).SDS-PAGE분석현시,전화질립pACYC184적록매소항성기인재수체세포내득도료표체.본방법적건립위송재선충휴대적형광가단포균적기인도입제공기술지지.위진일보통과기인고제적방법,선택성지실활특정공능기인,진이학정저사기인재송재선충병병리진정중적작용전정기출.도2삼16