CAJ | 학술논문

目的:观察静脉注射基因和微泡声学造影剂,同时经皮超声辐照肝脏的方式是否能增强外源MxA基因在小鼠肝脏中的定位表达,并探讨不同辐照参数对该基因表达的影响.方法:(1)不同转染方法对转染效率的影响:采用昆明小鼠24只,随机分为4组.分别为质粒转染组、微泡+质粒组、超声+质粒组和微泡+超声+质粒组.7 d后分别取肝、心、脾、肾、肺和骨骼肌,采用间接免疫荧光法进行MxA蛋白的半定量检测.(2)不同辐照参数对基因表达的影响:采用昆明小鼠20只,随机分为4组.按转染不同超声辐照声强分为0.25 W/cm2组、0.5 W/cm2组、0.75 W/cm2组和1.0 W/cm2组.7 d后分别取肝组织,采用间接免疫荧光法进行MxA蛋白的半定量检测.结果:(1) 肝脏每高倍视野表达阳性细胞数在微泡+超声+质粒组最高,其次为超声+质粒组,再次为微泡+质粒组,表达最少的为质粒组;各组间两两比较,均有显著统计学差异(P<0.001);超声+微泡+质粒组中检测发现,脾组织偶有MxA表达阳性细胞,其余各组仅在肝组织存在MxA表达.(2)肝脏每高倍视野表达阳性细胞数0.5 W/cm2组最高,其次为0.75 W/cm2组,再次为1.0 W/cm2组,0.25 W/cm2组表达最少;各组间两两比较,均有显著统计学差异(P<0.001).结论:超声微泡破碎技术能显著增强外源MxA基因在小鼠肝脏中的靶向性表达;超声辐照频率不变的条件下,在一定范围内增加声强,能促进外源MxA基因在小鼠肝脏表达;当声强为0.5 W/cm2时,转染率最高;该技术生物安全性好,为肝脏疾病的基因治疗提供了一项高效、安全的转染技术.
목적:관찰정맥주사기인화미포성학조영제,동시경피초성복조간장적방식시부능증강외원MxA기인재소서간장중적정위표체,병탐토불동복조삼수대해기인표체적영향.방법:(1)불동전염방법대전염효솔적영향:채용곤명소서24지,수궤분위4조.분별위질립전염조、미포+질립조、초성+질립조화미포+초성+질립조.7 d후분별취간、심、비、신、폐화골격기,채용간접면역형광법진행MxA단백적반정량검측.(2)불동복조삼수대기인표체적영향:채용곤명소서20지,수궤분위4조.안전염불동초성복조성강분위0.25 W/cm2조、0.5 W/cm2조、0.75 W/cm2조화1.0 W/cm2조.7 d후분별취간조직,채용간접면역형광법진행MxA단백적반정량검측.결과:(1) 간장매고배시야표체양성세포수재미포+초성+질립조최고,기차위초성+질립조,재차위미포+질립조,표체최소적위질립조;각조간량량비교,균유현저통계학차이(P<0.001);초성+미포+질립조중검측발현,비조직우유MxA표체양성세포,기여각조부재간조직존재MxA표체.(2)간장매고배시야표체양성세포수0.5 W/cm2조최고,기차위0.75 W/cm2조,재차위1.0 W/cm2조,0.25 W/cm2조표체최소;각조간량량비교,균유현저통계학차이(P<0.001).결론:초성미포파쇄기술능현저증강외원MxA기인재소서간장중적파향성표체;초성복조빈솔불변적조건하,재일정범위내증가성강,능촉진외원MxA기인재소서간장표체;당성강위0.5 W/cm2시,전염솔최고;해기술생물안전성호,위간장질병적기인치료제공료일항고효、안전적전염기술.