鸡胚胎干细胞分离方法和培养体系的优化
계배태간세포분리방법화배양체계적우화
Optimization of separation methods and culture system of chicken embryonic stem cells in vitro
  • 万方数据
    中国组织工程研究与临床康复 중국조직공정연구여림상강복
    JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
    2011年 45期 8429-8433 ,共5页

    张曼玉%陈志胜%计慧琴%陈胜峰%刘本杰%邓衔柏%王丙云%袁立%江青艳

    장만옥%진지성%계혜금%진성봉%류본걸%산함백%왕병운%원립%강청염

    鸡%胚胎干细胞%分离%培养%细胞因子 鷄%胚胎榦細胞%分離%培養%細胞因子
    계%배태간세포%분리%배양%세포인자
    背景:胚胎干细胞是从动物早期胚胎的内细胞团或原始生殖细胞分离出来的具有发育全能性的一种未分化的无限增殖细胞系.而鸡胚胎干细胞则是从X期鸡胚的胚盘分离而来.目的:优化鸡胚胎干细胞分离方法和离体培养体系.方法:采用滤纸纸环-发环的方法从X期鸡胚分离胚盘细胞,并采用STO细胞作为饲养层和大鼠肝细胞(BRL)条件培养基(CM)+细胞因子作为离体培养体系对分离的胚盘细胞进行培养.结果与结论:滤纸纸环-发环法获得的完整胚盘率为75%~85%,克隆形成率约为50%.BRL-CM+饲养层培养体系,鸡胚胎干细胞可传至7代,而BRL-CM+饲养层+细胞因子培养体系,鸡胚胎干细胞可传至25代.分离到的鸡胚胎干细胞,经碱性磷酸酶染色、SSEA-1染色鉴定,表明鸡胚胎干细胞处于未分化状态.提示,实验不仅优化了鸡胚胎的分离方法,获得完整且杂质少的胚盘,而且进一步优化了鸡胚胎干细胞体外培养体系.
    배경:배태간세포시종동물조기배태적내세포단혹원시생식세포분리출래적구유발육전능성적일충미분화적무한증식세포계.이계배태간세포칙시종X기계배적배반분리이래.목적:우화계배태간세포분리방법화리체배양체계.방법:채용려지지배-발배적방법종X기계배분리배반세포,병채용STO세포작위사양층화대서간세포(BRL)조건배양기(CM)+세포인자작위리체배양체계대분리적배반세포진행배양.결과여결론:려지지배-발배법획득적완정배반솔위75%~85%,극륭형성솔약위50%.BRL-CM+사양층배양체계,계배태간세포가전지7대,이BRL-CM+사양층+세포인자배양체계,계배태간세포가전지25대.분리도적계배태간세포,경감성린산매염색、SSEA-1염색감정,표명계배태간세포처우미분화상태.제시,실험불부우화료계배태적분리방법,획득완정차잡질소적배반,이차진일보우화료계배태간세포체외배양체계.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문