CAJ | 학술논문

目的观察由PC12细胞分化成的神经元样细胞与原代皮质神经元之间突触的形成情况,探讨移植细胞和宿主细胞形成神经连接的可能性及其机制.方法将增强型绿色荧光蛋白标记的PC12细胞种植到原代神经元和胶质细胞中,建立模拟细胞移植环境的共培养系统,以神经生长因子(NGF)诱导其中的PC12细胞分化为神经元样细胞.然后通过FM1-43荧光造影研究共培养系统中神经元突触小泡活动,电镜及胶体金标记免疫电镜两种方法观察两种神经元间的超微结构.结果与原代皮质细胞共培养的PC12细胞受NGF诱导后,分化的比例更高(由57.1%提高到67.8%, P<0.01);神经突起的长度明显高于对照组(由146.3 μm提高到272.2 μm, P<0.01).FM1-43造影显示,PC12细胞分化的神经元与原代神经元之间存在突触小泡活动;电镜下通过精确定位和胶体金标记,显示两种细胞间形成了比较典型的突触样连接.结论与原代皮质细胞共培养的PC12细胞在NGF诱导下可以分化为成熟的神经元,并与宿主来源的神经元形成功能性突触样连接,这为通过细胞移植治疗中枢神经系统疾病提供了一定线索.
목적관찰유PC12세포분화성적신경원양세포여원대피질신경원지간돌촉적형성정황,탐토이식세포화숙주세포형성신경련접적가능성급기궤제.방법장증강형록색형광단백표기적PC12세포충식도원대신경원화효질세포중,건립모의세포이식배경적공배양계통,이신경생장인자(NGF)유도기중적PC12세포분화위신경원양세포.연후통과FM1-43형광조영연구공배양계통중신경원돌촉소포활동,전경급효체금표기면역전경량충방법관찰량충신경원간적초미결구.결과여원대피질세포공배양적PC12세포수NGF유도후,분화적비례경고(유57.1%제고도67.8%, P<0.01);신경돌기적장도명현고우대조조(유146.3 μm제고도272.2 μm, P<0.01).FM1-43조영현시,PC12세포분화적신경원여원대신경원지간존재돌촉소포활동;전경하통과정학정위화효체금표기,현시량충세포간형성료비교전형적돌촉양련접.결론여원대피질세포공배양적PC12세포재NGF유도하가이분화위성숙적신경원,병여숙주래원적신경원형성공능성돌촉양련접,저위통과세포이식치료중추신경계통질병제공료일정선색.