中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2005年
5期
567-569
,共3页
朱育焱%孔垂泽%李实%李泽良%金铎%刘革非
硃育焱%孔垂澤%李實%李澤良%金鐸%劉革非
주육염%공수택%리실%리택량%금탁%류혁비
膀胱肿瘤%蛋白激酶%多药耐药基因
膀胱腫瘤%蛋白激酶%多藥耐藥基因
방광종류%단백격매%다약내약기인
目的探讨蛋白激酶C-α(PKCα) 对人膀胱癌T24细胞多药耐药的调节作用.方法将载有PKCα基因的表达质粒GFP-PKCα导入人膀胱癌细胞系T24.应用噻唑蓝(MTT)比色法,检测T24/PKCα及亲本细胞对阿霉素的敏感性,以及在激活(10 nmol/L PMA 2 h)和抑制(10 nmol/L Calphostin C 2 h)PKCα的情况下,T24/PKCα细胞对阿霉素敏感性的变化.同时用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测多药耐药基因-1(MDR-1)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药相关蛋白(LRP)基因的表达.结果转染了PKCα基因后,T24细胞对阿霉素的耐药性增强(耐药指数7.52,P<0.05).PKCα的激活显著提高了T24细胞的耐药性(耐药指数153.78,P<0.01),而抑制PKCα活性则使耐药指数降至1.20(P>0.05).T24/PKCα的MDR-1表达水平是亲本细胞的2.28倍(P<0.01).激活PKCα可使MDR-1基因表达水平较亲本细胞升高12.80倍(P<0.01),抑制PKCα则MDR-1表达下降(P>0.05),而MRP和LRP基因表达水平并无明显变化(P>0.05).结论 PKCα可能通过上调MDR-1表达,在人膀胱癌的化疗耐药中起到了重要的作用.
目的探討蛋白激酶C-α(PKCα) 對人膀胱癌T24細胞多藥耐藥的調節作用.方法將載有PKCα基因的錶達質粒GFP-PKCα導入人膀胱癌細胞繫T24.應用噻唑藍(MTT)比色法,檢測T24/PKCα及親本細胞對阿黴素的敏感性,以及在激活(10 nmol/L PMA 2 h)和抑製(10 nmol/L Calphostin C 2 h)PKCα的情況下,T24/PKCα細胞對阿黴素敏感性的變化.同時用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測多藥耐藥基因-1(MDR-1)、多藥耐藥相關蛋白(MRP)和肺耐藥相關蛋白(LRP)基因的錶達.結果轉染瞭PKCα基因後,T24細胞對阿黴素的耐藥性增彊(耐藥指數7.52,P<0.05).PKCα的激活顯著提高瞭T24細胞的耐藥性(耐藥指數153.78,P<0.01),而抑製PKCα活性則使耐藥指數降至1.20(P>0.05).T24/PKCα的MDR-1錶達水平是親本細胞的2.28倍(P<0.01).激活PKCα可使MDR-1基因錶達水平較親本細胞升高12.80倍(P<0.01),抑製PKCα則MDR-1錶達下降(P>0.05),而MRP和LRP基因錶達水平併無明顯變化(P>0.05).結論 PKCα可能通過上調MDR-1錶達,在人膀胱癌的化療耐藥中起到瞭重要的作用.
목적탐토단백격매C-α(PKCα) 대인방광암T24세포다약내약적조절작용.방법장재유PKCα기인적표체질립GFP-PKCα도입인방광암세포계T24.응용새서람(MTT)비색법,검측T24/PKCα급친본세포대아매소적민감성,이급재격활(10 nmol/L PMA 2 h)화억제(10 nmol/L Calphostin C 2 h)PKCα적정황하,T24/PKCα세포대아매소민감성적변화.동시용역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측다약내약기인-1(MDR-1)、다약내약상관단백(MRP)화폐내약상관단백(LRP)기인적표체.결과전염료PKCα기인후,T24세포대아매소적내약성증강(내약지수7.52,P<0.05).PKCα적격활현저제고료T24세포적내약성(내약지수153.78,P<0.01),이억제PKCα활성칙사내약지수강지1.20(P>0.05).T24/PKCα적MDR-1표체수평시친본세포적2.28배(P<0.01).격활PKCα가사MDR-1기인표체수평교친본세포승고12.80배(P<0.01),억제PKCα칙MDR-1표체하강(P>0.05),이MRP화LRP기인표체수평병무명현변화(P>0.05).결론 PKCα가능통과상조MDR-1표체,재인방광암적화료내약중기도료중요적작용.
