第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2004年
1期
32-35
,共4页
朱焕章%陈建泉%成国祥%薛京伦
硃煥章%陳建泉%成國祥%薛京倫
주환장%진건천%성국상%설경륜
转基因小鼠%lacZ%碱性磷酸酶%Cre重组酶
轉基因小鼠%lacZ%堿性燐痠酶%Cre重組酶
전기인소서%lacZ%감성린산매%Cre중조매
目的建立用于检测Cre位点特异重组酶活性的双报告转基因小鼠.方法采用显微注射方法,将携带lacZ和人碱性磷酸酶(human alkaline phosphatase,hAP)报告基因的ZAP载体导入近交C57BL/6小鼠554枚受精卵;利用PCR,Southern blotting技术对其仔鼠进行基因整合鉴定;应用X-gal染色方法,对转基因小鼠胚胎进行转基因表达检测.结果存活的398枚受精卵被移入21只假孕受体小鼠输卵管;13只受体怀孕产下68只后代.合子存活率和出生率分别为71%(398/554)和17%(68/398).在68只小鼠中,5只雄性和4只雌性小鼠整合有双报告基因.转基因整合率和有效率分别为13%(9/68)和1.6%(9/554).9只首建鼠与正常C57 BL/6小鼠杂交产生F1代小鼠.F1代小鼠转基因的传递符合孟德尔规律,X-gal染色仅在3只首建鼠的13.5 d龄胚胎中观察到.结论检测Cre位点特异重组酶活性的双报告转基因小鼠已建立.
目的建立用于檢測Cre位點特異重組酶活性的雙報告轉基因小鼠.方法採用顯微註射方法,將攜帶lacZ和人堿性燐痠酶(human alkaline phosphatase,hAP)報告基因的ZAP載體導入近交C57BL/6小鼠554枚受精卵;利用PCR,Southern blotting技術對其仔鼠進行基因整閤鑒定;應用X-gal染色方法,對轉基因小鼠胚胎進行轉基因錶達檢測.結果存活的398枚受精卵被移入21隻假孕受體小鼠輸卵管;13隻受體懷孕產下68隻後代.閤子存活率和齣生率分彆為71%(398/554)和17%(68/398).在68隻小鼠中,5隻雄性和4隻雌性小鼠整閤有雙報告基因.轉基因整閤率和有效率分彆為13%(9/68)和1.6%(9/554).9隻首建鼠與正常C57 BL/6小鼠雜交產生F1代小鼠.F1代小鼠轉基因的傳遞符閤孟德爾規律,X-gal染色僅在3隻首建鼠的13.5 d齡胚胎中觀察到.結論檢測Cre位點特異重組酶活性的雙報告轉基因小鼠已建立.
목적건립용우검측Cre위점특이중조매활성적쌍보고전기인소서.방법채용현미주사방법,장휴대lacZ화인감성린산매(human alkaline phosphatase,hAP)보고기인적ZAP재체도입근교C57BL/6소서554매수정란;이용PCR,Southern blotting기술대기자서진행기인정합감정;응용X-gal염색방법,대전기인소서배태진행전기인표체검측.결과존활적398매수정란피이입21지가잉수체소서수란관;13지수체부잉산하68지후대.합자존활솔화출생솔분별위71%(398/554)화17%(68/398).재68지소서중,5지웅성화4지자성소서정합유쌍보고기인.전기인정합솔화유효솔분별위13%(9/68)화1.6%(9/554).9지수건서여정상C57 BL/6소서잡교산생F1대소서.F1대소서전기인적전체부합맹덕이규률,X-gal염색부재3지수건서적13.5 d령배태중관찰도.결론검측Cre위점특이중조매활성적쌍보고전기인소서이건립.
