生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2005年
2期
133-139
,共7页
孙敬%陈宏%杨颖%夏红飞%彭景楩
孫敬%陳宏%楊穎%夏紅飛%彭景楩
손경%진굉%양영%하홍비%팽경편
SD大鼠%抑制消减杂交%子宫%差别表达基因%尿鸟苷蛋白
SD大鼠%抑製消減雜交%子宮%差彆錶達基因%尿鳥苷蛋白
SD대서%억제소감잡교%자궁%차별표체기인%뇨조감단백
采用抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),以SD大鼠为实验材料,选取妊娠过程中植入前期(第5天,D5)和分娩前期(第19天,D19)子宫分别作为驱动方(driver)和实验方(teste4),进行抑制消减杂交,获得的消减文库经差异筛选得到70个阳性克隆.序列测定和同源对比分析表明,这些克隆所代表的基因在大鼠基因库中分别与8个已知基因有90%~100%不等的同源性.这些基因均差别表达于分娩前期子宫组织中,其中首次发现尿鸟苷蛋白和干扰素诱导蛋白16在SD大鼠妊娠子宫中有表达.RT-PCR及半定量分析显示,尿鸟苷蛋白基因在妊娠第19天子宫中的表达显著高于妊娠第5天(P<0.001),而干扰素诱导蛋白16差异表达不明显.在妊娠D6、D9和D12的子宫中尿鸟苷蛋白基因自胚泡植入后其表达逐渐上升,妊娠D15下降,在妊娠D19表达量最高.结果提示特异表达的尿鸟苷蛋白基因可能与分娩有关.
採用抑製消減雜交技術(suppression subtractive hybridization,SSH),以SD大鼠為實驗材料,選取妊娠過程中植入前期(第5天,D5)和分娩前期(第19天,D19)子宮分彆作為驅動方(driver)和實驗方(teste4),進行抑製消減雜交,穫得的消減文庫經差異篩選得到70箇暘性剋隆.序列測定和同源對比分析錶明,這些剋隆所代錶的基因在大鼠基因庫中分彆與8箇已知基因有90%~100%不等的同源性.這些基因均差彆錶達于分娩前期子宮組織中,其中首次髮現尿鳥苷蛋白和榦擾素誘導蛋白16在SD大鼠妊娠子宮中有錶達.RT-PCR及半定量分析顯示,尿鳥苷蛋白基因在妊娠第19天子宮中的錶達顯著高于妊娠第5天(P<0.001),而榦擾素誘導蛋白16差異錶達不明顯.在妊娠D6、D9和D12的子宮中尿鳥苷蛋白基因自胚泡植入後其錶達逐漸上升,妊娠D15下降,在妊娠D19錶達量最高.結果提示特異錶達的尿鳥苷蛋白基因可能與分娩有關.
채용억제소감잡교기술(suppression subtractive hybridization,SSH),이SD대서위실험재료,선취임신과정중식입전기(제5천,D5)화분면전기(제19천,D19)자궁분별작위구동방(driver)화실험방(teste4),진행억제소감잡교,획득적소감문고경차이사선득도70개양성극륭.서렬측정화동원대비분석표명,저사극륭소대표적기인재대서기인고중분별여8개이지기인유90%~100%불등적동원성.저사기인균차별표체우분면전기자궁조직중,기중수차발현뇨조감단백화간우소유도단백16재SD대서임신자궁중유표체.RT-PCR급반정량분석현시,뇨조감단백기인재임신제19천자궁중적표체현저고우임신제5천(P<0.001),이간우소유도단백16차이표체불명현.재임신D6、D9화D12적자궁중뇨조감단백기인자배포식입후기표체축점상승,임신D15하강,재임신D19표체량최고.결과제시특이표체적뇨조감단백기인가능여분면유관.