农药学学报
農藥學學報
농약학학보
CHINESE JOURNAL OF PESTICIDE SCIENCE
2005年
3期
215-220
,共6页
席真%牛聪伟%李庆霞%欧阳砥%班树荣
席真%牛聰偉%李慶霞%歐暘砥%班樹榮
석진%우총위%리경하%구양지%반수영
乙酰乳酸合成酶%乙酰羟基酸合成酶%定点突变%突变体%酶的动力学
乙酰乳痠閤成酶%乙酰羥基痠閤成酶%定點突變%突變體%酶的動力學
을선유산합성매%을선간기산합성매%정점돌변%돌변체%매적동역학
针对除草剂敏感型乙酰羟基酸合成酶E. coli AHAS II的抗性域,引入W464A、W464F、W464L、W464Y点突变.采用Megaprimer PCR定点突变,测序鉴定,构建了4个E. coli AHAS IIW464位点的突变体.通过对E. coli AHAS II野生型及突变体动力学性质的测定,发现它们对于底物-丙酮酸及3种辅助因子(FAD、ThDP、Mg2+)有着不同的特征常数.这些部分抗性酶系的建立以及对动力学性质的系统研究,为探讨AHAS酶对农药分子抗性的作用机制、设计合成新除草剂及其筛选体系提供了基础.
針對除草劑敏感型乙酰羥基痠閤成酶E. coli AHAS II的抗性域,引入W464A、W464F、W464L、W464Y點突變.採用Megaprimer PCR定點突變,測序鑒定,構建瞭4箇E. coli AHAS IIW464位點的突變體.通過對E. coli AHAS II野生型及突變體動力學性質的測定,髮現它們對于底物-丙酮痠及3種輔助因子(FAD、ThDP、Mg2+)有著不同的特徵常數.這些部分抗性酶繫的建立以及對動力學性質的繫統研究,為探討AHAS酶對農藥分子抗性的作用機製、設計閤成新除草劑及其篩選體繫提供瞭基礎.
침대제초제민감형을선간기산합성매E. coli AHAS II적항성역,인입W464A、W464F、W464L、W464Y점돌변.채용Megaprimer PCR정점돌변,측서감정,구건료4개E. coli AHAS IIW464위점적돌변체.통과대E. coli AHAS II야생형급돌변체동역학성질적측정,발현타문대우저물-병동산급3충보조인자(FAD、ThDP、Mg2+)유착불동적특정상수.저사부분항성매계적건립이급대동역학성질적계통연구,위탐토AHAS매대농약분자항성적작용궤제、설계합성신제초제급기사선체계제공료기출.