中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2006年
10期
13-17
,共5页
张国广%曾雅明%李东霄%张红心%陈亮
張國廣%曾雅明%李東霄%張紅心%陳亮
장국엄%증아명%리동소%장홍심%진량
霍乱弧菌CTB基因%原核表达%粘膜佐剂活性
霍亂弧菌CTB基因%原覈錶達%粘膜佐劑活性
곽란호균CTB기인%원핵표체%점막좌제활성
霍乱弧菌CTB蛋白具有免疫佐剂活性.根据已发表CTB基因的序列设计一对引物,从一株霍乱弧菌中扩增出CTB基因,测序后发现该基因全长375bp,与国内分离的六株CTB基因的同源性达96.0%～99.2%.将该基因与pTWIN1连接构建了原核表达载体pTWIN1-CTB,重组表达载体转化BL21(DE3)表达菌株,0.8mmol/L IPTG诱导4h后,收获的细菌总蛋白SDS-PAGE电泳显示CTB在原核表达系统中得到表达,融合蛋白大小与理论值符合,蛋白产量占细菌总蛋白的20%左右,主要以包涵体形式存在,Western杂交和GM1-ELISA结果表明重组蛋白具有免疫原性和粘膜佐剂活性.
霍亂弧菌CTB蛋白具有免疫佐劑活性.根據已髮錶CTB基因的序列設計一對引物,從一株霍亂弧菌中擴增齣CTB基因,測序後髮現該基因全長375bp,與國內分離的六株CTB基因的同源性達96.0%～99.2%.將該基因與pTWIN1連接構建瞭原覈錶達載體pTWIN1-CTB,重組錶達載體轉化BL21(DE3)錶達菌株,0.8mmol/L IPTG誘導4h後,收穫的細菌總蛋白SDS-PAGE電泳顯示CTB在原覈錶達繫統中得到錶達,融閤蛋白大小與理論值符閤,蛋白產量佔細菌總蛋白的20%左右,主要以包涵體形式存在,Western雜交和GM1-ELISA結果錶明重組蛋白具有免疫原性和粘膜佐劑活性.
곽란호균CTB단백구유면역좌제활성.근거이발표CTB기인적서렬설계일대인물,종일주곽란호균중확증출CTB기인,측서후발현해기인전장375bp,여국내분리적륙주CTB기인적동원성체96.0%～99.2%.장해기인여pTWIN1련접구건료원핵표체재체pTWIN1-CTB,중조표체재체전화BL21(DE3)표체균주,0.8mmol/L IPTG유도4h후,수획적세균총단백SDS-PAGE전영현시CTB재원핵표체계통중득도표체,융합단백대소여이론치부합,단백산량점세균총단백적20%좌우,주요이포함체형식존재,Western잡교화GM1-ELISA결과표명중조단백구유면역원성화점막좌제활성.
