基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2009年
1期
33-37
,共5页
李卫东%张晓刚%常静%蒋芳萍
李衛東%張曉剛%常靜%蔣芳萍
리위동%장효강%상정%장방평
胚胎干细胞%共培养%分化%心肌细胞
胚胎榦細胞%共培養%分化%心肌細胞
배태간세포%공배양%분화%심기세포
目的 探讨心肌细胞促进胚胎干细胞(ESCs)分化为心肌样细胞的诱导作用.方法 收集小鼠3.5 d胚龄的囊胚,将其培养在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上,4～5 d后取内细胞团接种在饲养层上分离培养出ESCs.取3～5代ESCs,先将ESCs悬浮培养形成2～3 d的拟胚体(EBs),再与新生大鼠心肌细胞共培养诱导向心肌细胞分化,相差显微镜下观察分化细胞的形态学变化,免疫细胞荧光技术检测心肌细胞特异性肌钙蛋白T(TnT)、α-肌动蛋白(α-actin)的表达.结果 诱导第3天起可见自发性、有节律跳动的拟胚体出现,12 d时第2组约有93%的拟胚体出现节律性收缩,显著高于其他各组,均表达心肌细胞特异性蛋白cTnT、β-actin,心肌细胞直接接触诱导组其分化比率达56.5%,高于其他各组,并且分化的细胞形态较单一.结论 心肌细胞和心肌细胞裂解液均可诱导ESCs向心肌细胞定向分化,且心肌细胞的诱导作用强于心肌细胞裂解液.
目的 探討心肌細胞促進胚胎榦細胞(ESCs)分化為心肌樣細胞的誘導作用.方法 收集小鼠3.5 d胚齡的囊胚,將其培養在小鼠胚胎成纖維細胞飼養層上,4～5 d後取內細胞糰接種在飼養層上分離培養齣ESCs.取3～5代ESCs,先將ESCs懸浮培養形成2～3 d的擬胚體(EBs),再與新生大鼠心肌細胞共培養誘導嚮心肌細胞分化,相差顯微鏡下觀察分化細胞的形態學變化,免疫細胞熒光技術檢測心肌細胞特異性肌鈣蛋白T(TnT)、α-肌動蛋白(α-actin)的錶達.結果 誘導第3天起可見自髮性、有節律跳動的擬胚體齣現,12 d時第2組約有93%的擬胚體齣現節律性收縮,顯著高于其他各組,均錶達心肌細胞特異性蛋白cTnT、β-actin,心肌細胞直接接觸誘導組其分化比率達56.5%,高于其他各組,併且分化的細胞形態較單一.結論 心肌細胞和心肌細胞裂解液均可誘導ESCs嚮心肌細胞定嚮分化,且心肌細胞的誘導作用彊于心肌細胞裂解液.
목적 탐토심기세포촉진배태간세포(ESCs)분화위심기양세포적유도작용.방법 수집소서3.5 d배령적낭배,장기배양재소서배태성섬유세포사양층상,4～5 d후취내세포단접충재사양층상분리배양출ESCs.취3～5대ESCs,선장ESCs현부배양형성2～3 d적의배체(EBs),재여신생대서심기세포공배양유도향심기세포분화,상차현미경하관찰분화세포적형태학변화,면역세포형광기술검측심기세포특이성기개단백T(TnT)、α-기동단백(α-actin)적표체.결과 유도제3천기가견자발성、유절률도동적의배체출현,12 d시제2조약유93%적의배체출현절률성수축,현저고우기타각조,균표체심기세포특이성단백cTnT、β-actin,심기세포직접접촉유도조기분화비솔체56.5%,고우기타각조,병차분화적세포형태교단일.결론 심기세포화심기세포렬해액균가유도ESCs향심기세포정향분화,차심기세포적유도작용강우심기세포렬해액.
