中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2009年
3期
18-22
,共5页
马艳芳%刁有祥%张鑫%纪巍%孙法良%孙宁
馬豔芳%刁有祥%張鑫%紀巍%孫法良%孫寧
마염방%조유상%장흠%기외%손법량%손저
胸膜肺炎放线杆菌%毒素ApxⅠ%致病性%免疫原性
胸膜肺炎放線桿菌%毒素ApxⅠ%緻病性%免疫原性
흉막폐염방선간균%독소ApxⅠ%치병성%면역원성
将血清10型胸膜肺炎放线杆菌接种于含0.02%NAD、5%犊牛血清、1mMcaCl<,2>的LB液体培养基中培养12h,离心后的上清液经硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶分子筛层析,分离纯化Apx Ⅰ.将纯化的ApxⅠ进行半数致死量测定,并对小鼠剖检后进行内脏器官病理变化观察.将纯化的Apx Ⅰ与弗氏佐剂按1:1的比例混合制备亚单位疫苗,免疫小鼠,初免2周后加强免疫1次,二免2周后用血清10型胸膜肺炎放线杆菌攻毒,测定最佳免疫剂量.根据最佳免疫剂量于30日龄和45日龄免疫小鼠,60日龄时分别用血清1、3、5、7型胸膜肺炎放线杆菌攻毒.结果该毒素对小鼠的LD50为80.9mg/kg,LD50的95%平均可信限为63.2～103.5mg/kg;Apx Ⅰ亚单位疫苗的最佳免疫剂量为40μg,对血清1、3、5、7型胸膜肺炎放线杆菌的攻击具有一定的免疫保护效果.
將血清10型胸膜肺炎放線桿菌接種于含0.02%NAD、5%犢牛血清、1mMcaCl<,2>的LB液體培養基中培養12h,離心後的上清液經硫痠銨鹽析、葡聚糖凝膠分子篩層析,分離純化Apx Ⅰ.將純化的ApxⅠ進行半數緻死量測定,併對小鼠剖檢後進行內髒器官病理變化觀察.將純化的Apx Ⅰ與弗氏佐劑按1:1的比例混閤製備亞單位疫苗,免疫小鼠,初免2週後加彊免疫1次,二免2週後用血清10型胸膜肺炎放線桿菌攻毒,測定最佳免疫劑量.根據最佳免疫劑量于30日齡和45日齡免疫小鼠,60日齡時分彆用血清1、3、5、7型胸膜肺炎放線桿菌攻毒.結果該毒素對小鼠的LD50為80.9mg/kg,LD50的95%平均可信限為63.2～103.5mg/kg;Apx Ⅰ亞單位疫苗的最佳免疫劑量為40μg,對血清1、3、5、7型胸膜肺炎放線桿菌的攻擊具有一定的免疫保護效果.
장혈청10형흉막폐염방선간균접충우함0.02%NAD、5%독우혈청、1mMcaCl<,2>적LB액체배양기중배양12h,리심후적상청액경류산안염석、포취당응효분자사층석,분리순화Apx Ⅰ.장순화적ApxⅠ진행반수치사량측정,병대소서부검후진행내장기관병리변화관찰.장순화적Apx Ⅰ여불씨좌제안1:1적비례혼합제비아단위역묘,면역소서,초면2주후가강면역1차,이면2주후용혈청10형흉막폐염방선간균공독,측정최가면역제량.근거최가면역제량우30일령화45일령면역소서,60일령시분별용혈청1、3、5、7형흉막폐염방선간균공독.결과해독소대소서적LD50위80.9mg/kg,LD50적95%평균가신한위63.2～103.5mg/kg;Apx Ⅰ아단위역묘적최가면역제량위40μg,대혈청1、3、5、7형흉막폐염방선간균적공격구유일정적면역보호효과.
