安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
15期
6916-6917,6967
,共3页
猪链球菌2型%epf基因%胞外因子%原核表达%蛋白纯化
豬鏈毬菌2型%epf基因%胞外因子%原覈錶達%蛋白純化
저련구균2형%epf기인%포외인자%원핵표체%단백순화
为了克隆、表达SS2菌株epf基因片段,分析蛋白活性,根据GenBank SS2 epf基因序列设计引物,克隆epf基因片段并进行序列分析,构建原核表达质粒pGEX4T-2epf,在大肠杆菌中诱导带有GST标签的融合蛋白rEF-GST的表达;亲和层析法纯化融合蛋白rEF-GST,用凝血酶切除重组蛋白中的GST,获得纯化的EF抗原.经Western blot鉴定,EF可与SS2多克隆抗血清发生特异性反应.
為瞭剋隆、錶達SS2菌株epf基因片段,分析蛋白活性,根據GenBank SS2 epf基因序列設計引物,剋隆epf基因片段併進行序列分析,構建原覈錶達質粒pGEX4T-2epf,在大腸桿菌中誘導帶有GST標籤的融閤蛋白rEF-GST的錶達;親和層析法純化融閤蛋白rEF-GST,用凝血酶切除重組蛋白中的GST,穫得純化的EF抗原.經Western blot鑒定,EF可與SS2多剋隆抗血清髮生特異性反應.
위료극륭、표체SS2균주epf기인편단,분석단백활성,근거GenBank SS2 epf기인서렬설계인물,극륭epf기인편단병진행서렬분석,구건원핵표체질립pGEX4T-2epf,재대장간균중유도대유GST표첨적융합단백rEF-GST적표체;친화층석법순화융합단백rEF-GST,용응혈매절제중조단백중적GST,획득순화적EF항원.경Western blot감정,EF가여SS2다극륭항혈청발생특이성반응.
