中国肿瘤临床
中國腫瘤臨床
중국종류림상
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY
2011年
13期
759-762
,共4页
丁明霞%李翀%左毅刚%詹辉%范祖森%王剑松
丁明霞%李翀%左毅剛%詹輝%範祖森%王劍鬆
정명하%리충%좌의강%첨휘%범조삼%왕검송
膀胱癌%EJ细胞%单克隆抗体%CD44%糖基化
膀胱癌%EJ細胞%單剋隆抗體%CD44%糖基化
방광암%EJ세포%단극륭항체%CD44%당기화
目的:研究EJ细胞单抗KMP1的结合抗原CD44的变化和KMP1对EJ细胞生物学功能的影响.方法:采用人膀胱癌EJ细胞株免疫BALB/c小鼠,获得单抗KMP1,免疫荧光检测KMP1的亲和性、结合部位及效价.流式细胞检测KMP1对膀胱癌细胞的特异性.免疫组化检测对膀胱癌组织的特异性.亲和层析分离纯化特异性抗原,检测抗原的氨基酸序列.糖基转化酶抑制剂和过碘酸氧化后分析抗原决定簇的理化性质改变.软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验检测KMP1对EJ细胞株的增殖和迁移功能的影响.结果:获得的单抗KMP1是IgG1,能与EJ、BIU-87、T24膀胱癌细胞和膀胱癌组织特异性结合,而与Lovo、HeLa、K562、HepG2、Jurkat、293、HCV29、人的红细胞和白细胞无结合性,也不能结合正常膀胱黏膜.其结合EJ细胞的抗原是异常糖基化的CD44,糖基转化酶抑制剂BG作用EJ细胞7d,KMP1对EJ细胞结合性降低,过碘酸氧化后Westernblot显示KMP1对CD44结合性降低,软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验结果示KMP1还能减弱EJ细胞的增殖和迁移功能.结论:膀胱癌的高复发性、易转移可能与出现异常糖基化的CD44高表达具有一定的相关性,KMP1可结合异常糖基化的CD44,并抑制EJ细胞的增殖和迁移.
目的:研究EJ細胞單抗KMP1的結閤抗原CD44的變化和KMP1對EJ細胞生物學功能的影響.方法:採用人膀胱癌EJ細胞株免疫BALB/c小鼠,穫得單抗KMP1,免疫熒光檢測KMP1的親和性、結閤部位及效價.流式細胞檢測KMP1對膀胱癌細胞的特異性.免疫組化檢測對膀胱癌組織的特異性.親和層析分離純化特異性抗原,檢測抗原的氨基痠序列.糖基轉化酶抑製劑和過碘痠氧化後分析抗原決定簇的理化性質改變.軟瓊脂培養剋隆形成實驗和細胞劃痕實驗檢測KMP1對EJ細胞株的增殖和遷移功能的影響.結果:穫得的單抗KMP1是IgG1,能與EJ、BIU-87、T24膀胱癌細胞和膀胱癌組織特異性結閤,而與Lovo、HeLa、K562、HepG2、Jurkat、293、HCV29、人的紅細胞和白細胞無結閤性,也不能結閤正常膀胱黏膜.其結閤EJ細胞的抗原是異常糖基化的CD44,糖基轉化酶抑製劑BG作用EJ細胞7d,KMP1對EJ細胞結閤性降低,過碘痠氧化後Westernblot顯示KMP1對CD44結閤性降低,軟瓊脂培養剋隆形成實驗和細胞劃痕實驗結果示KMP1還能減弱EJ細胞的增殖和遷移功能.結論:膀胱癌的高複髮性、易轉移可能與齣現異常糖基化的CD44高錶達具有一定的相關性,KMP1可結閤異常糖基化的CD44,併抑製EJ細胞的增殖和遷移.
목적:연구EJ세포단항KMP1적결합항원CD44적변화화KMP1대EJ세포생물학공능적영향.방법:채용인방광암EJ세포주면역BALB/c소서,획득단항KMP1,면역형광검측KMP1적친화성、결합부위급효개.류식세포검측KMP1대방광암세포적특이성.면역조화검측대방광암조직적특이성.친화층석분리순화특이성항원,검측항원적안기산서렬.당기전화매억제제화과전산양화후분석항원결정족적이화성질개변.연경지배양극륭형성실험화세포화흔실험검측KMP1대EJ세포주적증식화천이공능적영향.결과:획득적단항KMP1시IgG1,능여EJ、BIU-87、T24방광암세포화방광암조직특이성결합,이여Lovo、HeLa、K562、HepG2、Jurkat、293、HCV29、인적홍세포화백세포무결합성,야불능결합정상방광점막.기결합EJ세포적항원시이상당기화적CD44,당기전화매억제제BG작용EJ세포7d,KMP1대EJ세포결합성강저,과전산양화후Westernblot현시KMP1대CD44결합성강저,연경지배양극륭형성실험화세포화흔실험결과시KMP1환능감약EJ세포적증식화천이공능.결론:방광암적고복발성、역전이가능여출현이상당기화적CD44고표체구유일정적상관성,KMP1가결합이상당기화적CD44,병억제EJ세포적증식화천이.