浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2003年
6期
510-513
,共4页
氨氯地平%反相高效液相色谱%细胞色素-P450%转基因细胞%孵育
氨氯地平%反相高效液相色譜%細胞色素-P450%轉基因細胞%孵育
안록지평%반상고효액상색보%세포색소-P450%전기인세포%부육
目的:研究氨氯地平经人肝细胞色素P450 3A4(CYP3A4)的代谢,建立反相高效液相色谱的测定人肝转基因细胞CYP3A4酶S9孵育液中氨氯地平浓度的方法.方法:与人肝转基因细胞提取的S9上清液孵育之后的样品,用3倍量的甲醇沉淀后离心,取上清液用0.45 μm微孔滤膜滤过后进样.采用Hypersil C18柱,以乙腈-磷酸盐缓冲液(45∶55,v/v,pH 4.5)为流动相,普萘洛尔为内标,在250 nm波长处测定.结果:氨氯地平浓度在0.2～30.0 μg/ml范围内线性关系良好,r=0.9993,方法平均回收率为(98.2±2.4)%(n=5),日内和日间相对标准偏差(RSD)均小于10%,检测限为20 ng/ml,定量限为0.2 μg/ml(回收率为104.0%,RSD为11.4%,n=5).结论:建立的反相高效液相色谱方法简便、准确,可用于研究氨氯地平在人肝CYP3A4转基因细胞中的代谢.
目的:研究氨氯地平經人肝細胞色素P450 3A4(CYP3A4)的代謝,建立反相高效液相色譜的測定人肝轉基因細胞CYP3A4酶S9孵育液中氨氯地平濃度的方法.方法:與人肝轉基因細胞提取的S9上清液孵育之後的樣品,用3倍量的甲醇沉澱後離心,取上清液用0.45 μm微孔濾膜濾過後進樣.採用Hypersil C18柱,以乙腈-燐痠鹽緩遲液(45∶55,v/v,pH 4.5)為流動相,普萘洛爾為內標,在250 nm波長處測定.結果:氨氯地平濃度在0.2～30.0 μg/ml範圍內線性關繫良好,r=0.9993,方法平均迴收率為(98.2±2.4)%(n=5),日內和日間相對標準偏差(RSD)均小于10%,檢測限為20 ng/ml,定量限為0.2 μg/ml(迴收率為104.0%,RSD為11.4%,n=5).結論:建立的反相高效液相色譜方法簡便、準確,可用于研究氨氯地平在人肝CYP3A4轉基因細胞中的代謝.
목적:연구안록지평경인간세포색소P450 3A4(CYP3A4)적대사,건립반상고효액상색보적측정인간전기인세포CYP3A4매S9부육액중안록지평농도적방법.방법:여인간전기인세포제취적S9상청액부육지후적양품,용3배량적갑순침정후리심,취상청액용0.45 μm미공려막려과후진양.채용Hypersil C18주,이을정-린산염완충액(45∶55,v/v,pH 4.5)위류동상,보내락이위내표,재250 nm파장처측정.결과:안록지평농도재0.2～30.0 μg/ml범위내선성관계량호,r=0.9993,방법평균회수솔위(98.2±2.4)%(n=5),일내화일간상대표준편차(RSD)균소우10%,검측한위20 ng/ml,정량한위0.2 μg/ml(회수솔위104.0%,RSD위11.4%,n=5).결론:건립적반상고효액상색보방법간편、준학,가용우연구안록지평재인간CYP3A4전기인세포중적대사.
