第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
3期
285-288
,共4页
彭毅%龚小卫%邓鹏%秦清和%姜勇
彭毅%龔小衛%鄧鵬%秦清和%薑勇
팽의%공소위%산붕%진청화%강용
p38调节活化蛋白激酶(PRAK)%绿色荧光蛋白(GFP)%载体构建%基因表达
p38調節活化蛋白激酶(PRAK)%綠色熒光蛋白(GFP)%載體構建%基因錶達
p38조절활화단백격매(PRAK)%록색형광단백(GFP)%재체구건%기인표체
目的构建在哺乳动物细胞中表达的PRAK绿色荧光蛋白融合表达载体.方法将克隆在pET-14b上的PRAK亚克隆到绿色荧光蛋白载体DEGFP-C2上,随后转染Hela细胞,并在荧光显微镜下观察.结果重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在Hela细胞中得到高量表达.融合蛋白发出的绿色荧光表明EGFP-PRAK主要分布在细胞核中.结论成功构建了PRAK绿色荧光蛋白融合载体,该载体能在哺乳动物细胞中进行表达,为研究PRAK的细胞内定位和移位提供了一个重要的工具.
目的構建在哺乳動物細胞中錶達的PRAK綠色熒光蛋白融閤錶達載體.方法將剋隆在pET-14b上的PRAK亞剋隆到綠色熒光蛋白載體DEGFP-C2上,隨後轉染Hela細胞,併在熒光顯微鏡下觀察.結果重組質粒經酶切、PCR和測序鑒定正確無誤,併在Hela細胞中得到高量錶達.融閤蛋白髮齣的綠色熒光錶明EGFP-PRAK主要分佈在細胞覈中.結論成功構建瞭PRAK綠色熒光蛋白融閤載體,該載體能在哺乳動物細胞中進行錶達,為研究PRAK的細胞內定位和移位提供瞭一箇重要的工具.
목적구건재포유동물세포중표체적PRAK록색형광단백융합표체재체.방법장극륭재pET-14b상적PRAK아극륭도록색형광단백재체DEGFP-C2상,수후전염Hela세포,병재형광현미경하관찰.결과중조질립경매절、PCR화측서감정정학무오,병재Hela세포중득도고량표체.융합단백발출적록색형광표명EGFP-PRAK주요분포재세포핵중.결론성공구건료PRAK록색형광단백융합재체,해재체능재포유동물세포중진행표체,위연구PRAK적세포내정위화이위제공료일개중요적공구.
