中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2005年
3期
229-236
,共8页
齐小娟%王政%蔡朱男%张斌%余应年
齊小娟%王政%蔡硃男%張斌%餘應年
제소연%왕정%채주남%장빈%여응년
荧光共振能量转移%前列腺特异抗原%荧光蛋白%生物传感技术
熒光共振能量轉移%前列腺特異抗原%熒光蛋白%生物傳感技術
형광공진능량전이%전렬선특이항원%형광단백%생물전감기술
目的构建可在体外应用荧光共振能量转移(FRET)技术检测具有酶活性的前列腺特异抗原(PSA)的生物检测器.方法构建原核细胞表达质粒,从而在大肠杆菌中表达在供体和受体荧光蛋白之间以PSA特异性识别氨基酸序列SSYYSG连接的融合蛋白.将纯化的融合蛋白依次用糜蛋白酶、胰蛋白酶、商品化的纯品PSA及精液切割,检测其荧光共振能量转移现象的变化.结果糜蛋白酶、商品化的纯品PSA及精液切割均可有效抑制融合蛋白的FRET现象,并表现出对时间和剂量的依赖关系.而胰蛋白酶在90 min内未见FRET抑制现象.结论本研究构建的FRET检测器可成功检测具有酶活性的PSA,为活性PSA的检测提供一种可选择的途径.
目的構建可在體外應用熒光共振能量轉移(FRET)技術檢測具有酶活性的前列腺特異抗原(PSA)的生物檢測器.方法構建原覈細胞錶達質粒,從而在大腸桿菌中錶達在供體和受體熒光蛋白之間以PSA特異性識彆氨基痠序列SSYYSG連接的融閤蛋白.將純化的融閤蛋白依次用糜蛋白酶、胰蛋白酶、商品化的純品PSA及精液切割,檢測其熒光共振能量轉移現象的變化.結果糜蛋白酶、商品化的純品PSA及精液切割均可有效抑製融閤蛋白的FRET現象,併錶現齣對時間和劑量的依賴關繫.而胰蛋白酶在90 min內未見FRET抑製現象.結論本研究構建的FRET檢測器可成功檢測具有酶活性的PSA,為活性PSA的檢測提供一種可選擇的途徑.
목적구건가재체외응용형광공진능량전이(FRET)기술검측구유매활성적전렬선특이항원(PSA)적생물검측기.방법구건원핵세포표체질립,종이재대장간균중표체재공체화수체형광단백지간이PSA특이성식별안기산서렬SSYYSG련접적융합단백.장순화적융합단백의차용미단백매、이단백매、상품화적순품PSA급정액절할,검측기형광공진능량전이현상적변화.결과미단백매、상품화적순품PSA급정액절할균가유효억제융합단백적FRET현상,병표현출대시간화제량적의뢰관계.이이단백매재90 min내미견FRET억제현상.결론본연구구건적FRET검측기가성공검측구유매활성적PSA,위활성PSA적검측제공일충가선택적도경.
