癌症
癌癥
암증
CHINESE JOURNAL OF CANCER
2005年
6期
657-662
,共6页
尹晓然%张梅%骆云雅%林秀%贺鹏程%陈丽梅%蔡瑞波%郭桂丽
尹曉然%張梅%駱雲雅%林秀%賀鵬程%陳麗梅%蔡瑞波%郭桂麗
윤효연%장매%락운아%림수%하붕정%진려매%채서파%곽계려
多发性骨髓瘤%树突细胞%独特型蛋白%细胞毒性T淋巴细胞
多髮性骨髓瘤%樹突細胞%獨特型蛋白%細胞毒性T淋巴細胞
다발성골수류%수돌세포%독특형단백%세포독성T림파세포
背景与目的:大多数多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)无法通过大剂量化疗和造血干细胞移植治愈,应用树突细胞(DCs)瘤苗清除MM患者化疗后残留的骨髓瘤细胞,是近年来骨髓瘤免疫疗法的新策略.本研究旨在探讨负载Id的DC独特型瘤苗对自体MM细胞的体外杀伤作用.方法:从MM患者外周血中分离获取DCs前体细胞,用GM-CSF与IL-4诱导分化,培养第5天加入从患者血清中提取的IgG的F(ab')2片段(Id),第7天加TNF-ct促成熟,将Id冲击致敏的DCs与自体T淋巴细胞共培养3天,获得肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs).MTT法检测致敏DCs促自体T淋巴细胞增殖能力,以及患者CTLs对自体MM细胞的特异性细胞毒杀伤作用.结果:GM-CSF、IL-4和TNF-ot联合可以有效地从MM患者外周血单核细胞中诱导出大量成熟的功能性DCs.MM患者自体血清Id冲击致敏的成熟DCs能够显著提高T细胞增殖能力,且与DC:T的比值呈正相关;同时在1:10时刺激细胞为负载了Id的成熟DC组刺激指数(SI)值(39.1±6.0)%,明显高于未经Id刺激的成熟DC组、经Id刺激的未成熟DC组以及未经Id刺激的未成熟DC组[(19.3±7.7)%、(15.9±6.1)%和(11.4±4.9)%].负载了Id的成熟DC能够使幼稚T细胞活化成为肿瘤独特型CTLs,各个剂量的CTLs均能诱导出针对自体MM细胞的抑制性杀伤反应,并且与效靶比呈正相关;未负载Id的成熟DCs也能诱导出该种杀伤活性,但是效靶比30:1时,肿瘤杀伤率为(40.8±7.8)%,明显低于负载Id的成熟DCs组的肿瘤杀伤率(70.1±7.9)%.经KRN7000冲击后的DCs激发后,异体T细胞可出现显著增殖,与DC:T的比值呈正相关;在1:10时刺激细胞为KRN7000冲击的成熟DC组[SI=(38.5±5.7)%],明显高于未经KRN7000冲击的成熟DC组[SI=(20.2±5.7)%].结论:从MM患者外周血中可培养扩增大量典型DC、能够提取出具有生物活性的Id,使用负载Id的DC瘤苗能够诱导出有效的抗肿瘤免疫应答反应,KRN7000可以加强体外诱导培养的成熟DCs刺激T细胞增殖能力.
揹景與目的:大多數多髮性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)無法通過大劑量化療和造血榦細胞移植治愈,應用樹突細胞(DCs)瘤苗清除MM患者化療後殘留的骨髓瘤細胞,是近年來骨髓瘤免疫療法的新策略.本研究旨在探討負載Id的DC獨特型瘤苗對自體MM細胞的體外殺傷作用.方法:從MM患者外週血中分離穫取DCs前體細胞,用GM-CSF與IL-4誘導分化,培養第5天加入從患者血清中提取的IgG的F(ab')2片段(Id),第7天加TNF-ct促成熟,將Id遲擊緻敏的DCs與自體T淋巴細胞共培養3天,穫得腫瘤特異性細胞毒性T淋巴細胞(CTLs).MTT法檢測緻敏DCs促自體T淋巴細胞增殖能力,以及患者CTLs對自體MM細胞的特異性細胞毒殺傷作用.結果:GM-CSF、IL-4和TNF-ot聯閤可以有效地從MM患者外週血單覈細胞中誘導齣大量成熟的功能性DCs.MM患者自體血清Id遲擊緻敏的成熟DCs能夠顯著提高T細胞增殖能力,且與DC:T的比值呈正相關;同時在1:10時刺激細胞為負載瞭Id的成熟DC組刺激指數(SI)值(39.1±6.0)%,明顯高于未經Id刺激的成熟DC組、經Id刺激的未成熟DC組以及未經Id刺激的未成熟DC組[(19.3±7.7)%、(15.9±6.1)%和(11.4±4.9)%].負載瞭Id的成熟DC能夠使幼稚T細胞活化成為腫瘤獨特型CTLs,各箇劑量的CTLs均能誘導齣針對自體MM細胞的抑製性殺傷反應,併且與效靶比呈正相關;未負載Id的成熟DCs也能誘導齣該種殺傷活性,但是效靶比30:1時,腫瘤殺傷率為(40.8±7.8)%,明顯低于負載Id的成熟DCs組的腫瘤殺傷率(70.1±7.9)%.經KRN7000遲擊後的DCs激髮後,異體T細胞可齣現顯著增殖,與DC:T的比值呈正相關;在1:10時刺激細胞為KRN7000遲擊的成熟DC組[SI=(38.5±5.7)%],明顯高于未經KRN7000遲擊的成熟DC組[SI=(20.2±5.7)%].結論:從MM患者外週血中可培養擴增大量典型DC、能夠提取齣具有生物活性的Id,使用負載Id的DC瘤苗能夠誘導齣有效的抗腫瘤免疫應答反應,KRN7000可以加彊體外誘導培養的成熟DCs刺激T細胞增殖能力.
배경여목적:대다수다발성골수류(multiple myeloma,MM)무법통과대제양화료화조혈간세포이식치유,응용수돌세포(DCs)류묘청제MM환자화료후잔류적골수류세포,시근년래골수류면역요법적신책략.본연구지재탐토부재Id적DC독특형류묘대자체MM세포적체외살상작용.방법:종MM환자외주혈중분리획취DCs전체세포,용GM-CSF여IL-4유도분화,배양제5천가입종환자혈청중제취적IgG적F(ab')2편단(Id),제7천가TNF-ct촉성숙,장Id충격치민적DCs여자체T림파세포공배양3천,획득종류특이성세포독성T림파세포(CTLs).MTT법검측치민DCs촉자체T림파세포증식능력,이급환자CTLs대자체MM세포적특이성세포독살상작용.결과:GM-CSF、IL-4화TNF-ot연합가이유효지종MM환자외주혈단핵세포중유도출대량성숙적공능성DCs.MM환자자체혈청Id충격치민적성숙DCs능구현저제고T세포증식능력,차여DC:T적비치정정상관;동시재1:10시자격세포위부재료Id적성숙DC조자격지수(SI)치(39.1±6.0)%,명현고우미경Id자격적성숙DC조、경Id자격적미성숙DC조이급미경Id자격적미성숙DC조[(19.3±7.7)%、(15.9±6.1)%화(11.4±4.9)%].부재료Id적성숙DC능구사유치T세포활화성위종류독특형CTLs,각개제량적CTLs균능유도출침대자체MM세포적억제성살상반응,병차여효파비정정상관;미부재Id적성숙DCs야능유도출해충살상활성,단시효파비30:1시,종류살상솔위(40.8±7.8)%,명현저우부재Id적성숙DCs조적종류살상솔(70.1±7.9)%.경KRN7000충격후적DCs격발후,이체T세포가출현현저증식,여DC:T적비치정정상관;재1:10시자격세포위KRN7000충격적성숙DC조[SI=(38.5±5.7)%],명현고우미경KRN7000충격적성숙DC조[SI=(20.2±5.7)%].결론:종MM환자외주혈중가배양확증대량전형DC、능구제취출구유생물활성적Id,사용부재Id적DC류묘능구유도출유효적항종류면역응답반응,KRN7000가이가강체외유도배양적성숙DCs자격T세포증식능력.
