中国优生与遗传杂志
中國優生與遺傳雜誌
중국우생여유전잡지
CHINESE JOURNAL OF BIRTH HEALTH AND HEREDITY
2006年
5期
17-18,21
,共3页
基因芯片%PCR扩增%内切酶%连接酶
基因芯片%PCR擴增%內切酶%連接酶
기인심편%PCR확증%내절매%련접매
本文利用DNA引物和探针设计软件DNAClub和Primer 5.0,根据从Genbank中查得的巨细胞病毒(HCMV169)、单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ,Ⅱ)、风疹病毒(RV)和弓形虫(TOX)基因序列分别设计16只寡核苷酸探针,长度30bp左右,合成后用简易手动点样仪MicroCaster按4×4矩阵点在氨基化玻片上,制成基因芯片;将被检测致病微生物DNA和质粒载体DNA用同一种内切酶切割、连接成"杂种"DNA,再利用载体上的通用引物进行PCR扩增和荧光染料标记扩增产物,并将该产物与DNA芯片杂交,用芯片扫描仪GeneTACTMUC4(Genomic Solutions Inc)进行扫描,利用随机提供的软件GeneTAC Integrator Microarray Analysis Software Version3.30进行数据处理和分析.结果用该种方法制备的基因芯片可同时检测5种致病微生物,将用荧光定量PCR检测的阳性标本用基因芯片检测结果基本一致.
本文利用DNA引物和探針設計軟件DNAClub和Primer 5.0,根據從Genbank中查得的巨細胞病毒(HCMV169)、單純皰疹病毒(HSV-Ⅰ,Ⅱ)、風疹病毒(RV)和弓形蟲(TOX)基因序列分彆設計16隻寡覈苷痠探針,長度30bp左右,閤成後用簡易手動點樣儀MicroCaster按4×4矩陣點在氨基化玻片上,製成基因芯片;將被檢測緻病微生物DNA和質粒載體DNA用同一種內切酶切割、連接成"雜種"DNA,再利用載體上的通用引物進行PCR擴增和熒光染料標記擴增產物,併將該產物與DNA芯片雜交,用芯片掃描儀GeneTACTMUC4(Genomic Solutions Inc)進行掃描,利用隨機提供的軟件GeneTAC Integrator Microarray Analysis Software Version3.30進行數據處理和分析.結果用該種方法製備的基因芯片可同時檢測5種緻病微生物,將用熒光定量PCR檢測的暘性標本用基因芯片檢測結果基本一緻.
본문이용DNA인물화탐침설계연건DNAClub화Primer 5.0,근거종Genbank중사득적거세포병독(HCMV169)、단순포진병독(HSV-Ⅰ,Ⅱ)、풍진병독(RV)화궁형충(TOX)기인서렬분별설계16지과핵감산탐침,장도30bp좌우,합성후용간역수동점양의MicroCaster안4×4구진점재안기화파편상,제성기인심편;장피검측치병미생물DNA화질립재체DNA용동일충내절매절할、련접성"잡충"DNA,재이용재체상적통용인물진행PCR확증화형광염료표기확증산물,병장해산물여DNA심편잡교,용심편소묘의GeneTACTMUC4(Genomic Solutions Inc)진행소묘,이용수궤제공적연건GeneTAC Integrator Microarray Analysis Software Version3.30진행수거처리화분석.결과용해충방법제비적기인심편가동시검측5충치병미생물,장용형광정량PCR검측적양성표본용기인심편검측결과기본일치.
