CAJ | 학술논문

目的:建立人大肠癌多药耐药细胞株HCT-8/5-FU及并对其耐药机制进行探讨.方法:先采用较大剂量间歇诱导法进行筛选,再采用浓度梯度递增法作用,历时7 mo,至HCT8细胞可长期在5-FU浓度为2.0 mg/L的细胞培养液中稳定生长.电镜、HE染色观察2种细胞形态结构差异.体外细胞毒性实验观察他对5-FU, ADM,DDP的耐药性.绘制亲本细胞和耐药细胞的体外生长曲线.罗丹明染色法检测其两种细胞P-gp功能表达.结果:HCT-8细胞株经7 mo诱导,可在5-FU 2.0 g/L的培养液中稳定增殖,具有多药耐药性,命名为HCT-8/5-FU,该细胞株对5-FU的耐药指数为16.6,并对ADM,DDP有交叉耐药性.该细胞株体外群体倍增时间与亲本细胞差别不显著.HE染色观察耐药细胞胞体较亲本细胞大,细胞核不规则,可见双核、多形核,细胞形态不规则,呈多角形、细长形改变,可见巨核细胞.透射电镜下耐药细胞胞质内线粒体、内质网、溶酶体增多.流式细胞仪罗丹明染色法观察荧光强度曲线左移,提示耐药细胞有过度P-gp表达.结论:成功建立HCT-8/5-FU多药耐药细胞株.先采用较大剂量间歇诱导进行筛选,再采用浓度梯度递增法作用是诱导大肠癌耐药细胞株的较好方式.HCT-8/5-FU细胞株的耐药机制与P-糖蛋白表达有关.
목적:건립인대장암다약내약세포주HCT-8/5-FU급병대기내약궤제진행탐토.방법:선채용교대제량간헐유도법진행사선,재채용농도제도체증법작용,력시7 mo,지HCT8세포가장기재5-FU농도위2.0 mg/L적세포배양액중은정생장.전경、HE염색관찰2충세포형태결구차이.체외세포독성실험관찰타대5-FU, ADM,DDP적내약성.회제친본세포화내약세포적체외생장곡선.라단명염색법검측기량충세포P-gp공능표체.결과:HCT-8세포주경7 mo유도,가재5-FU 2.0 g/L적배양액중은정증식,구유다약내약성,명명위HCT-8/5-FU,해세포주대5-FU적내약지수위16.6,병대ADM,DDP유교차내약성.해세포주체외군체배증시간여친본세포차별불현저.HE염색관찰내약세포포체교친본세포대,세포핵불규칙,가견쌍핵、다형핵,세포형태불규칙,정다각형、세장형개변,가견거핵세포.투사전경하내약세포포질내선립체、내질망、용매체증다.류식세포의라단명염색법관찰형광강도곡선좌이,제시내약세포유과도P-gp표체.결론:성공건립HCT-8/5-FU다약내약세포주.선채용교대제량간헐유도진행사선,재채용농도제도체증법작용시유도대장암내약세포주적교호방식.HCT-8/5-FU세포주적내약궤제여P-당단백표체유관.