中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2007年
11期
33-37
,共5页
苏建青%郑学星%候小强%岳妙姝%夏咸柱
囌建青%鄭學星%候小彊%嶽妙姝%夏鹹柱
소건청%정학성%후소강%악묘주%하함주
TaqMan探针%荧光定量%犬瘟热病毒
TaqMan探針%熒光定量%犬瘟熱病毒
TaqMan탐침%형광정량%견온열병독
根据犬瘟热病毒核蛋白基因的保守序列分别设计一对引物及其相应的Taqman探针建立荧光定量PCR.构建FQ-PCR绝对定量的标准品,并对反应体系进行优化,建立绝对定量的标准曲线.利用十倍稀释法检验方法的灵敏度并与普通RT-PCR法进行比较;特异性检验后进行临床标本的检验.结果显示:实验成功构建了绝对定量的参照质粒,标准曲线相关系数为0.994.犬瘟热病毒FQ-PCR检测反应的灵敏度为10 TCID50;5种非犬瘟热病毒病原体检测均为阴性;说明实验建立的FQ-PCR具有快速、灵敏和稳定的特点,适用于临床样品的检验.
根據犬瘟熱病毒覈蛋白基因的保守序列分彆設計一對引物及其相應的Taqman探針建立熒光定量PCR.構建FQ-PCR絕對定量的標準品,併對反應體繫進行優化,建立絕對定量的標準麯線.利用十倍稀釋法檢驗方法的靈敏度併與普通RT-PCR法進行比較;特異性檢驗後進行臨床標本的檢驗.結果顯示:實驗成功構建瞭絕對定量的參照質粒,標準麯線相關繫數為0.994.犬瘟熱病毒FQ-PCR檢測反應的靈敏度為10 TCID50;5種非犬瘟熱病毒病原體檢測均為陰性;說明實驗建立的FQ-PCR具有快速、靈敏和穩定的特點,適用于臨床樣品的檢驗.
근거견온열병독핵단백기인적보수서렬분별설계일대인물급기상응적Taqman탐침건립형광정량PCR.구건FQ-PCR절대정량적표준품,병대반응체계진행우화,건립절대정량적표준곡선.이용십배희석법검험방법적령민도병여보통RT-PCR법진행비교;특이성검험후진행림상표본적검험.결과현시:실험성공구건료절대정량적삼조질립,표준곡선상관계수위0.994.견온열병독FQ-PCR검측반응적령민도위10 TCID50;5충비견온열병독병원체검측균위음성;설명실험건립적FQ-PCR구유쾌속、령민화은정적특점,괄용우림상양품적검험.
