徐州医学院学报
徐州醫學院學報
서주의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU
2011年
5期
293-296
,共4页
张翠翠%陈巍巍%徐兴顺%耿德勤
張翠翠%陳巍巍%徐興順%耿德勤
장취취%진외외%서흥순%경덕근
低氧诱导因子-1α%necroptosis%缺糖缺氧%原代皮质神经元
低氧誘導因子-1α%necroptosis%缺糖缺氧%原代皮質神經元
저양유도인자-1α%necroptosis%결당결양%원대피질신경원
目的 探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是否参与缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis.方法 原代皮质神经元培养14天,予caspase抑制剂Z-VAD-FMK(20 μmol/L)预保护30 min,缺糖缺氧2 h,再灌注0、2、6、12、24、48 h,进行LDH测定;RT-PCR测HIF-1α RNA表达;Western blot检测总HIF-1α蛋白表达情况;分别提取细胞质和细胞核蛋白,Western blot分别检测胞质、胞核内HIF-1α蛋白表达情况.结果 caspase抑制剂Z-VAD-FMK预作用30 min、缺糖缺氧2 h、再灌注2 h后培养基中LDH增加(P＜0.05),再灌注12 h达高峰;缺糖缺氧后HIF-1α RNA表达无变化(P＞0.05);HIF-1α总蛋白表达增加(P＜0.05),再灌注12 h达高峰;再灌注6 h时细胞质HIF-1α蛋白表达达高峰(P＜0.05),随后降低;再灌注12 h时,细胞核HIF-1α蛋白表达达高峰(P＜0.05),随后降低.结论 HIF-1α参与缺糖缺氧诱导的原代皮质神经元necroptosis.
目的 探討低氧誘導因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是否參與缺糖缺氧誘導的原代皮質神經元necroptosis.方法 原代皮質神經元培養14天,予caspase抑製劑Z-VAD-FMK(20 μmol/L)預保護30 min,缺糖缺氧2 h,再灌註0、2、6、12、24、48 h,進行LDH測定;RT-PCR測HIF-1α RNA錶達;Western blot檢測總HIF-1α蛋白錶達情況;分彆提取細胞質和細胞覈蛋白,Western blot分彆檢測胞質、胞覈內HIF-1α蛋白錶達情況.結果 caspase抑製劑Z-VAD-FMK預作用30 min、缺糖缺氧2 h、再灌註2 h後培養基中LDH增加(P＜0.05),再灌註12 h達高峰;缺糖缺氧後HIF-1α RNA錶達無變化(P＞0.05);HIF-1α總蛋白錶達增加(P＜0.05),再灌註12 h達高峰;再灌註6 h時細胞質HIF-1α蛋白錶達達高峰(P＜0.05),隨後降低;再灌註12 h時,細胞覈HIF-1α蛋白錶達達高峰(P＜0.05),隨後降低.結論 HIF-1α參與缺糖缺氧誘導的原代皮質神經元necroptosis.
목적 탐토저양유도인자-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)시부삼여결당결양유도적원대피질신경원necroptosis.방법 원대피질신경원배양14천,여caspase억제제Z-VAD-FMK(20 μmol/L)예보호30 min,결당결양2 h,재관주0、2、6、12、24、48 h,진행LDH측정;RT-PCR측HIF-1α RNA표체;Western blot검측총HIF-1α단백표체정황;분별제취세포질화세포핵단백,Western blot분별검측포질、포핵내HIF-1α단백표체정황.결과 caspase억제제Z-VAD-FMK예작용30 min、결당결양2 h、재관주2 h후배양기중LDH증가(P＜0.05),재관주12 h체고봉;결당결양후HIF-1α RNA표체무변화(P＞0.05);HIF-1α총단백표체증가(P＜0.05),재관주12 h체고봉;재관주6 h시세포질HIF-1α단백표체체고봉(P＜0.05),수후강저;재관주12 h시,세포핵HIF-1α단백표체체고봉(P＜0.05),수후강저.결론 HIF-1α삼여결당결양유도적원대피질신경원necroptosis.
