CAJ | 학술논문

背景:研究者们通过多种方法从肌组织中分离得到肌源干细胞,并应用于各类组织工程和再生医学研究.目的:结合改良的差速贴壁法和有限稀释技术分离小鼠来源肌源干细胞,并培养其单细胞克隆和亚克隆集落.方法:以新生C57BL/6小鼠四肢作为肌组织取材对象,经三重酶消化和细胞筛过滤,运用改良的差速贴壁法分离出肌源干细胞,予细胞特异标记物以免疫组织化学染色;以有限稀释技术克隆培养的方法,获得稳定的肌源干细胞单克隆和亚克隆集落.结果与结论:差速贴壁培养过程中,肌性细胞占比逐渐增高,首次贴壁1 h可以获得足够数量的细胞进行第6次贴壁培养;肌源干细胞需72 h左右贴壁生长,经10 d左右可以增殖为300~500细胞数量的集落,细胞形态以小圆形细胞为主,并有少量梭形细胞,肌源干细胞能够维持形态并持续增殖;应用有限稀释技术可获得肌源干细胞单克隆和亚克隆集落,肌源干细胞克隆细胞均呈现Desmin染色阳性,Sca-1染色阳性,阳性率为(92.3±4.1)%.提示应用preplate法和有限稀释技术可以分离得到小鼠来源肌源干细胞及其克隆集落.
배경:연구자문통과다충방법종기조직중분리득도기원간세포,병응용우각류조직공정화재생의학연구.목적:결합개량적차속첩벽법화유한희석기술분리소서래원기원간세포,병배양기단세포극륭화아극륭집락.방법:이신생C57BL/6소서사지작위기조직취재대상,경삼중매소화화세포사과려,운용개량적차속첩벽법분리출기원간세포,여세포특이표기물이면역조직화학염색;이유한희석기술극륭배양적방법,획득은정적기원간세포단극륭화아극륭집락.결과여결론:차속첩벽배양과정중,기성세포점비축점증고,수차첩벽1 h가이획득족구수량적세포진행제6차첩벽배양;기원간세포수72 h좌우첩벽생장,경10 d좌우가이증식위300~500세포수량적집락,세포형태이소원형세포위주,병유소량사형세포,기원간세포능구유지형태병지속증식;응용유한희석기술가획득기원간세포단극륭화아극륭집락,기원간세포극륭세포균정현Desmin염색양성,Sca-1염색양성,양성솔위(92.3±4.1)%.제시응용preplate법화유한희석기술가이분리득도소서래원기원간세포급기극륭집락.