渔业科学进展
漁業科學進展
어업과학진전
MARINE FISHERIES RESEARCH
2012年
2期
76-85
,共10页
梁高峰%梁艳%成君军%张士璀%黄倢
樑高峰%樑豔%成君軍%張士璀%黃倢
량고봉%량염%성군군%장사최%황첩
凡纳滨对虾%虾造血激素%RACE%原核表达
凡納濱對蝦%蝦造血激素%RACE%原覈錶達
범납빈대하%하조혈격소%RACE%원핵표체
虾造血激素(astakine,AST)是节肢动物中具有促进造血组织细胞分化和增殖的一种细胞因子.在对白斑综合征病毒(WSSV)感染分子机制的研究中发现,WSSV的一个可能受体蛋白与AST存在特异性结合.为进一步了解WSSV感染与对虾细胞分化之间的关系,本研究应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)结合cDNA末端快速扩增(RACE)技术,成功克隆了凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei造血激素基因(lvast)全长cDNA(GenBank登录号:HM594944),并对该基因进行了生物信息学分析.lvast全长共1 846bp,含有1个372bp的开放阅读框,编码124个氨基酸,估算分子量为13.3kD.其编码的氨基酸序列包含一个前动力蛋白(Prokineticin)结构域.基因序列和氨基酸序列同源性比较表明,凡纳滨对虾造血激素(LvAST)与斑节对虾和软尾太平蝲蛄AST同源性较高,与脊椎动物的同源性较低.通过构建包含lvast基因ORF重组表达载体pBAD/glIIA-lvast,本研究成功表达出与预期相符合的目的蛋白,为进一步研究LvAST的结构与功能提供了理论依据和实验基础.
蝦造血激素(astakine,AST)是節肢動物中具有促進造血組織細胞分化和增殖的一種細胞因子.在對白斑綜閤徵病毒(WSSV)感染分子機製的研究中髮現,WSSV的一箇可能受體蛋白與AST存在特異性結閤.為進一步瞭解WSSV感染與對蝦細胞分化之間的關繫,本研究應用反轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)結閤cDNA末耑快速擴增(RACE)技術,成功剋隆瞭凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei造血激素基因(lvast)全長cDNA(GenBank登錄號:HM594944),併對該基因進行瞭生物信息學分析.lvast全長共1 846bp,含有1箇372bp的開放閱讀框,編碼124箇氨基痠,估算分子量為13.3kD.其編碼的氨基痠序列包含一箇前動力蛋白(Prokineticin)結構域.基因序列和氨基痠序列同源性比較錶明,凡納濱對蝦造血激素(LvAST)與斑節對蝦和軟尾太平蝲蛄AST同源性較高,與脊椎動物的同源性較低.通過構建包含lvast基因ORF重組錶達載體pBAD/glIIA-lvast,本研究成功錶達齣與預期相符閤的目的蛋白,為進一步研究LvAST的結構與功能提供瞭理論依據和實驗基礎.
하조혈격소(astakine,AST)시절지동물중구유촉진조혈조직세포분화화증식적일충세포인자.재대백반종합정병독(WSSV)감염분자궤제적연구중발현,WSSV적일개가능수체단백여AST존재특이성결합.위진일보료해WSSV감염여대하세포분화지간적관계,본연구응용반전록취합매련식반응(RT-PCR)결합cDNA말단쾌속확증(RACE)기술,성공극륭료범납빈대하Litopenaeus vannamei조혈격소기인(lvast)전장cDNA(GenBank등록호:HM594944),병대해기인진행료생물신식학분석.lvast전장공1 846bp,함유1개372bp적개방열독광,편마124개안기산,고산분자량위13.3kD.기편마적안기산서렬포함일개전동력단백(Prokineticin)결구역.기인서렬화안기산서렬동원성비교표명,범납빈대하조혈격소(LvAST)여반절대하화연미태평랄고AST동원성교고,여척추동물적동원성교저.통과구건포함lvast기인ORF중조표체재체pBAD/glIIA-lvast,본연구성공표체출여예기상부합적목적단백,위진일보연구LvAST적결구여공능제공료이론의거화실험기출.
