中华传染病杂志
中華傳染病雜誌
중화전염병잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
2007年
11期
655-658
,共4页
陈阳%方政%姜声扬%黄为群%谢东方%吴建军%石佑琴
陳暘%方政%薑聲颺%黃為群%謝東方%吳建軍%石祐琴
진양%방정%강성양%황위군%사동방%오건군%석우금
布鲁丝虫属%原肌球蛋白%克隆,分子%序列分析,DNA%表位,B淋巴细胞
佈魯絲蟲屬%原肌毬蛋白%剋隆,分子%序列分析,DNA%錶位,B淋巴細胞
포로사충속%원기구단백%극륭,분자%서렬분석,DNA%표위,B림파세포
目的 克隆周期型马来丝虫副肌球蛋白(BmPmy)基因,进行序列测定、分析及编码产物的B细胞表位预测.方法 从周期型马来丝虫虫体中抽提总RNA,以mRNA为模板,RT-PCR法体外扩增BmPmy基因,扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pGEM T载体,转化E.coli DH5α,筛选阳性克隆,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒pGEM-T-BmPmy,经测序验证,并进行同源性比较.应用5种参数和方法对其编码产物进行B细胞表位预测.结果 RT-PCR扩增出一条约2 640 bp的特异性条带,重组质粒双酶切的PCR结果与预期相符,DNA序列分析与基因库已知的基因序列同源性为99%.经表位预测分析,BmPmy的B细胞表位可能在54～66位、144～152位、770～780位和834～845位氨基酸区域.结论 成功构建了BmPmy重组质粒pGEM-T克隆载体,为进一步研究该基因的功能提供了条件.
目的 剋隆週期型馬來絲蟲副肌毬蛋白(BmPmy)基因,進行序列測定、分析及編碼產物的B細胞錶位預測.方法 從週期型馬來絲蟲蟲體中抽提總RNA,以mRNA為模闆,RT-PCR法體外擴增BmPmy基因,擴增產物經初步鑒定後將其剋隆入pGEM T載體,轉化E.coli DH5α,篩選暘性剋隆,進行雙酶切及PCR擴增鑒定,穫得暘性重組質粒pGEM-T-BmPmy,經測序驗證,併進行同源性比較.應用5種參數和方法對其編碼產物進行B細胞錶位預測.結果 RT-PCR擴增齣一條約2 640 bp的特異性條帶,重組質粒雙酶切的PCR結果與預期相符,DNA序列分析與基因庫已知的基因序列同源性為99%.經錶位預測分析,BmPmy的B細胞錶位可能在54～66位、144～152位、770～780位和834～845位氨基痠區域.結論 成功構建瞭BmPmy重組質粒pGEM-T剋隆載體,為進一步研究該基因的功能提供瞭條件.
목적 극륭주기형마래사충부기구단백(BmPmy)기인,진행서렬측정、분석급편마산물적B세포표위예측.방법 종주기형마래사충충체중추제총RNA,이mRNA위모판,RT-PCR법체외확증BmPmy기인,확증산물경초보감정후장기극륭입pGEM T재체,전화E.coli DH5α,사선양성극륭,진행쌍매절급PCR확증감정,획득양성중조질립pGEM-T-BmPmy,경측서험증,병진행동원성비교.응용5충삼수화방법대기편마산물진행B세포표위예측.결과 RT-PCR확증출일조약2 640 bp적특이성조대,중조질립쌍매절적PCR결과여예기상부,DNA서렬분석여기인고이지적기인서렬동원성위99%.경표위예측분석,BmPmy적B세포표위가능재54～66위、144～152위、770～780위화834～845위안기산구역.결론 성공구건료BmPmy중조질립pGEM-T극륭재체,위진일보연구해기인적공능제공료조건.
