农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2002年
1期
77-80
,共4页
于群%张杰%王晓明%丁之铨%黄大昉
于群%張傑%王曉明%丁之銓%黃大昉
우군%장걸%왕효명%정지전%황대방
荧光假单胞菌%分离克隆%复制子%穿梭载体
熒光假單胞菌%分離剋隆%複製子%穿梭載體
형광가단포균%분리극륭%복제자%천사재체
从国内多个地区的65份土样中分离纯化了产荧光假单胞菌株146株,其中菌株DSC3和DKXC1含有质粒.细胞形态、菌落特征的观察和检测证明DKXCl菌株为恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida).以其为出发菌株,克隆了该菌质粒DNA复制子1.7kb片段,序列分析结果表明该DNA片段由3个ORF组成,分别编码311、130、115个氨基酸;它与已知的Pf-E.coli穿梭质粒pUCP19的复制区同源性只有49%.该复制子DNA序列已在GenBank登记,登记号为AF273219,这是国内分离克隆的第一个Pseudomonas质粒DNA复制子.以此复制子构建了4.7 kb的E.coli-Pf穿梭载体pYQSPE,该质粒在荧光假单胞菌P303中能够稳定复制和遗传.
從國內多箇地區的65份土樣中分離純化瞭產熒光假單胞菌株146株,其中菌株DSC3和DKXC1含有質粒.細胞形態、菌落特徵的觀察和檢測證明DKXCl菌株為噁臭假單胞菌(Pseudomonasputida).以其為齣髮菌株,剋隆瞭該菌質粒DNA複製子1.7kb片段,序列分析結果錶明該DNA片段由3箇ORF組成,分彆編碼311、130、115箇氨基痠;它與已知的Pf-E.coli穿梭質粒pUCP19的複製區同源性隻有49%.該複製子DNA序列已在GenBank登記,登記號為AF273219,這是國內分離剋隆的第一箇Pseudomonas質粒DNA複製子.以此複製子構建瞭4.7 kb的E.coli-Pf穿梭載體pYQSPE,該質粒在熒光假單胞菌P303中能夠穩定複製和遺傳.
종국내다개지구적65빈토양중분리순화료산형광가단포균주146주,기중균주DSC3화DKXC1함유질립.세포형태、균락특정적관찰화검측증명DKXCl균주위악취가단포균(Pseudomonasputida).이기위출발균주,극륭료해균질립DNA복제자1.7kb편단,서렬분석결과표명해DNA편단유3개ORF조성,분별편마311、130、115개안기산;타여이지적Pf-E.coli천사질립pUCP19적복제구동원성지유49%.해복제자DNA서렬이재GenBank등기,등기호위AF273219,저시국내분리극륭적제일개Pseudomonas질립DNA복제자.이차복제자구건료4.7 kb적E.coli-Pf천사재체pYQSPE,해질립재형광가단포균P303중능구은정복제화유전.
