广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2003年
6期
585-587
,共3页
沈纪川%谢奇峰%翁锦生%顾琳%姚集鲁
瀋紀川%謝奇峰%翁錦生%顧琳%姚集魯
침기천%사기봉%옹금생%고림%요집로
共刺激分子B7-1%新型隐球菌%质粒
共刺激分子B7-1%新型隱毬菌%質粒
공자격분자B7-1%신형은구균%질립
目的构建包含新型隐球菌细胞免疫主要相关基因--迟发超敏反应抗原基因(delayed-type hypersentivity antigen 1,DHA1)与小鼠共刺激分子B7-1的嵌合重组质粒.方法设计合成两对寡核苷酸引物,用PCR法分别从pUCmB7-1TM和新型隐球菌重组质粒pcDNA3-DHA1中特异扩增出编码B7-1和DHA1的基因片段(921 bp和984 bp),分别用HindⅢ,EcoRⅠ,XbaⅠ酶切后,逐个定向连接到质粒pcDNA3中,转化宿主菌DH-5α,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒.结果酶切鉴定示所切下的片段大小均与预计相符,测序结果与文献报道序列及预计结果一致,证实符合表达框架.结论该研究成功构建了新型隐球菌嵌合重组质粒pcDNA3-B7-1-DHA1,为进一步研究新型隐球菌DNA免疫奠定了基础.
目的構建包含新型隱毬菌細胞免疫主要相關基因--遲髮超敏反應抗原基因(delayed-type hypersentivity antigen 1,DHA1)與小鼠共刺激分子B7-1的嵌閤重組質粒.方法設計閤成兩對寡覈苷痠引物,用PCR法分彆從pUCmB7-1TM和新型隱毬菌重組質粒pcDNA3-DHA1中特異擴增齣編碼B7-1和DHA1的基因片段(921 bp和984 bp),分彆用HindⅢ,EcoRⅠ,XbaⅠ酶切後,逐箇定嚮連接到質粒pcDNA3中,轉化宿主菌DH-5α,分彆用上述內切酶酶切及DNA測序鑒定重組質粒.結果酶切鑒定示所切下的片段大小均與預計相符,測序結果與文獻報道序列及預計結果一緻,證實符閤錶達框架.結論該研究成功構建瞭新型隱毬菌嵌閤重組質粒pcDNA3-B7-1-DHA1,為進一步研究新型隱毬菌DNA免疫奠定瞭基礎.
목적구건포함신형은구균세포면역주요상관기인--지발초민반응항원기인(delayed-type hypersentivity antigen 1,DHA1)여소서공자격분자B7-1적감합중조질립.방법설계합성량대과핵감산인물,용PCR법분별종pUCmB7-1TM화신형은구균중조질립pcDNA3-DHA1중특이확증출편마B7-1화DHA1적기인편단(921 bp화984 bp),분별용HindⅢ,EcoRⅠ,XbaⅠ매절후,축개정향련접도질립pcDNA3중,전화숙주균DH-5α,분별용상술내절매매절급DNA측서감정중조질립.결과매절감정시소절하적편단대소균여예계상부,측서결과여문헌보도서렬급예계결과일치,증실부합표체광가.결론해연구성공구건료신형은구균감합중조질립pcDNA3-B7-1-DHA1,위진일보연구신형은구균DNA면역전정료기출.
