中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2007年
2期
163-165
,共3页
BTC%基因克隆%原核表达载体
BTC%基因剋隆%原覈錶達載體
BTC%기인극륭%원핵표체재체
目的 构建人BTC基因的原核表达载体.方法 以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,克隆入原核细胞表达载体PET32a(+)中,经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定目的基因.结果 PCR扩增的特异性片段长度为240 bp,以此构建的重组质粒PET32a(+)-BTC,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后显示5.9 kb和250 bp左右的两条片段,测序结果与Genbank中的人BTC基因cDNA(Genbank序列号NM_001729)序列一致.证明人BTC基因已成功克隆到了原核细胞表达载体PET32a(+)中.结论 成功构建了PET32a(+)-BTC重组原核表达载体.
目的 構建人BTC基因的原覈錶達載體.方法 以人胰島細胞瘤cDNA為模闆,採用聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增BTC基因成熟蛋白編碼區的全部序列,剋隆入原覈細胞錶達載體PET32a(+)中,經限製性內切酶雙酶切及DNA序列分析鑒定目的基因.結果 PCR擴增的特異性片段長度為240 bp,以此構建的重組質粒PET32a(+)-BTC,經KpnⅠ和XhoⅠ雙酶切後顯示5.9 kb和250 bp左右的兩條片段,測序結果與Genbank中的人BTC基因cDNA(Genbank序列號NM_001729)序列一緻.證明人BTC基因已成功剋隆到瞭原覈細胞錶達載體PET32a(+)中.結論 成功構建瞭PET32a(+)-BTC重組原覈錶達載體.
목적 구건인BTC기인적원핵표체재체.방법 이인이도세포류cDNA위모판,채용취합매련식반응(PCR)확증BTC기인성숙단백편마구적전부서렬,극륭입원핵세포표체재체PET32a(+)중,경한제성내절매쌍매절급DNA서렬분석감정목적기인.결과 PCR확증적특이성편단장도위240 bp,이차구건적중조질립PET32a(+)-BTC,경KpnⅠ화XhoⅠ쌍매절후현시5.9 kb화250 bp좌우적량조편단,측서결과여Genbank중적인BTC기인cDNA(Genbank서렬호NM_001729)서렬일치.증명인BTC기인이성공극륭도료원핵세포표체재체PET32a(+)중.결론 성공구건료PET32a(+)-BTC중조원핵표체재체.
