CAJ | 학술논문

根据GenBank公开序列自行设计一对引物,采用RT-PCR扩增出鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)W和C9001分离株完整的核衣壳(N)基因,并将其克隆至pMD18-T载体进行核苷酸序列测定和分析.结果表明,扩增的2个IBV分离株核衣壳基因片段长度均为1 230 bp,编码409个氨基酸,彼此间核苷酸和氨基酸同源性分别为88.0%和89.5%,与GenBank中有代表性的参考毒株相应基因核苷酸和氨基酸序列比较显示,w株核苷酸序列与GenBank中的广东分离株(AY646283)同源性最高,为94.1%,氨基酸序列同源性为94.6%;与国内部分毒株核苷酸序列同源性在86.1%～88.0%之间,氨基酸序列同源性在88.0%～90.7%之间;C9001株与国内部分毒株核苷酸序列同源性在86.4%～99.8%之间,氨基酸序列同源性在88.0%～99.8%之间.从核衣壳基因编码的氨基酸序列的系统进化树可见,W株与C9001株处于不同的进化分枝,亲缘关系较远.同时将核衣壳基因构建于真核表达质粒pVAX1中,用脂质体法将重组质粒转染入COS-7细胞中,间接免疫荧光检测出核衣壳蛋白的体外表达.研究结果为进一步研究IBV核衣壳蛋白的结构与功能以及基因工程疫苗的研制奠定了基础.
근거GenBank공개서렬자행설계일대인물,채용RT-PCR확증출계전염성지기관염병독(Infectious bronchitis virus,IBV)W화C9001분리주완정적핵의각(N)기인,병장기극륭지pMD18-T재체진행핵감산서렬측정화분석.결과표명,확증적2개IBV분리주핵의각기인편단장도균위1 230 bp,편마409개안기산,피차간핵감산화안기산동원성분별위88.0%화89.5%,여GenBank중유대표성적삼고독주상응기인핵감산화안기산서렬비교현시,w주핵감산서렬여GenBank중적엄동분리주(AY646283)동원성최고,위94.1%,안기산서렬동원성위94.6%;여국내부분독주핵감산서렬동원성재86.1%～88.0%지간,안기산서렬동원성재88.0%～90.7%지간;C9001주여국내부분독주핵감산서렬동원성재86.4%～99.8%지간,안기산서렬동원성재88.0%～99.8%지간.종핵의각기인편마적안기산서렬적계통진화수가견,W주여C9001주처우불동적진화분지,친연관계교원.동시장핵의각기인구건우진핵표체질립pVAX1중,용지질체법장중조질립전염입COS-7세포중,간접면역형광검측출핵의각단백적체외표체.연구결과위진일보연구IBV핵의각단백적결구여공능이급기인공정역묘적연제전정료기출.