中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
4期
308-311
,共4页
孙红%万忠海%张国利%吴广谋%朱平%岳玉环
孫紅%萬忠海%張國利%吳廣謀%硃平%嶽玉環
손홍%만충해%장국리%오엄모%주평%악옥배
细胞间黏附分子-1%单克隆抗体%杂交瘤细胞%活性
細胞間黏附分子-1%單剋隆抗體%雜交瘤細胞%活性
세포간점부분자-1%단극륭항체%잡교류세포%활성
目的 制备具有生物活性的抗人细胞间黏附分子-1(ICAM-1)单克隆抗体.方法 以人ICAM-1为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术并经HAT选择培养和克隆化,筛选出稳定分泌抗人ICAM-1 McAb的杂交瘤细胞株,并对McAb进行纯化.用ELISA间接法测定效价并鉴定其亚类,Western blot鉴定其抗原特异性,细胞黏附试验检测其中和活性.结果 筛选出1株可稳定分泌抗人ICAM-1抗体的杂交瘤细胞株3F2,杂交瘤染色体众数为98～104.纯化后的单抗蛋白浓度为1.253 mg/ml,纯度达83.6%,效价可达2.56×105.其分泌的抗体亚型为IgGl,腹水效价达5.12×105,可与ICAM-1特异性结合,可抑制ICAM-1与淋巴瘤细胞间的黏附,具有明显的中和ICAM-1的活性.结论 已成功制备出抗ICAM-1的McAb,为其进一步的研究和应用奠定了基础.
目的 製備具有生物活性的抗人細胞間黏附分子-1(ICAM-1)單剋隆抗體.方法 以人ICAM-1為抗原免疫BALB/c小鼠,採用雜交瘤技術併經HAT選擇培養和剋隆化,篩選齣穩定分泌抗人ICAM-1 McAb的雜交瘤細胞株,併對McAb進行純化.用ELISA間接法測定效價併鑒定其亞類,Western blot鑒定其抗原特異性,細胞黏附試驗檢測其中和活性.結果 篩選齣1株可穩定分泌抗人ICAM-1抗體的雜交瘤細胞株3F2,雜交瘤染色體衆數為98～104.純化後的單抗蛋白濃度為1.253 mg/ml,純度達83.6%,效價可達2.56×105.其分泌的抗體亞型為IgGl,腹水效價達5.12×105,可與ICAM-1特異性結閤,可抑製ICAM-1與淋巴瘤細胞間的黏附,具有明顯的中和ICAM-1的活性.結論 已成功製備齣抗ICAM-1的McAb,為其進一步的研究和應用奠定瞭基礎.
목적 제비구유생물활성적항인세포간점부분자-1(ICAM-1)단극륭항체.방법 이인ICAM-1위항원면역BALB/c소서,채용잡교류기술병경HAT선택배양화극륭화,사선출은정분비항인ICAM-1 McAb적잡교류세포주,병대McAb진행순화.용ELISA간접법측정효개병감정기아류,Western blot감정기항원특이성,세포점부시험검측기중화활성.결과 사선출1주가은정분비항인ICAM-1항체적잡교류세포주3F2,잡교류염색체음수위98～104.순화후적단항단백농도위1.253 mg/ml,순도체83.6%,효개가체2.56×105.기분비적항체아형위IgGl,복수효개체5.12×105,가여ICAM-1특이성결합,가억제ICAM-1여림파류세포간적점부,구유명현적중화ICAM-1적활성.결론 이성공제비출항ICAM-1적McAb,위기진일보적연구화응용전정료기출.
