中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2009年
11期
1347-1349
,共3页
魏晓东%邓连瑞%张惠丹%欧芹
魏曉東%鄧連瑞%張惠丹%歐芹
위효동%산련서%장혜단%구근
灵芝多糖%人二倍体成纤维细胞%H2O2%衰老%细胞周期调控因子
靈芝多糖%人二倍體成纖維細胞%H2O2%衰老%細胞週期調控因子
령지다당%인이배체성섬유세포%H2O2%쇠로%세포주기조공인자
目的 探讨不同剂量灵芝多糖(GLP)对抗H2O2诱导的HDF细胞衰老及可能的细胞周期调控机制.方法 将HDF细胞培养至24代时分成6组:即青年组、对照组、衰老模型组及GLP小剂量(50 mg/L)、中剂量(100 mg/L)、大剂量(150 mg/L)组,体外DMEM培养,各GLP组和衰老模型组自30代始添加 H2O2诱导HDF细胞衰老,直至38代.采用MTT法检测细胞活力;Dimri法检测β-半乳糖苷酶活性;RT-PCR法检测p16INK4a、CyclinD1、CDK4的表达;Western印迹法检测Rb蛋白表达和磷酸化Rb.结果 与青年组及对照组比较,衰老模型组细胞活力下降(P＜0.01),β-半乳糖苷酶活性升高(P＜0.01),CyclinD1 mRNA表达升高(P＜0.01),CDK4 mRNA表达下降(P＜0.01),p16INK4a表达升高(P＜0.01),Rb磷酸化减少(P＜0.01);与衰老模型组细胞比较,中剂量和大剂量GLP细胞活力明显提高(均P＜0.01),而β-半乳糖苷酶活性降低(均P＜0.01),CyclinD1 mRNA表达降低(均P＜0.01),CDK4 mRNA表达升高(均P＜0.01),p16INK4a表达降低,Rb磷酸化增多(均P＜0.01),但两组之间差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 GLP可通过改变细胞周期调控因子CyclinD1/CDK4/p16INK4a进而调节Rb的磷酸化状态,发挥抗H2O2诱导的HDF细胞衰老作用.
目的 探討不同劑量靈芝多糖(GLP)對抗H2O2誘導的HDF細胞衰老及可能的細胞週期調控機製.方法 將HDF細胞培養至24代時分成6組:即青年組、對照組、衰老模型組及GLP小劑量(50 mg/L)、中劑量(100 mg/L)、大劑量(150 mg/L)組,體外DMEM培養,各GLP組和衰老模型組自30代始添加 H2O2誘導HDF細胞衰老,直至38代.採用MTT法檢測細胞活力;Dimri法檢測β-半乳糖苷酶活性;RT-PCR法檢測p16INK4a、CyclinD1、CDK4的錶達;Western印跡法檢測Rb蛋白錶達和燐痠化Rb.結果 與青年組及對照組比較,衰老模型組細胞活力下降(P＜0.01),β-半乳糖苷酶活性升高(P＜0.01),CyclinD1 mRNA錶達升高(P＜0.01),CDK4 mRNA錶達下降(P＜0.01),p16INK4a錶達升高(P＜0.01),Rb燐痠化減少(P＜0.01);與衰老模型組細胞比較,中劑量和大劑量GLP細胞活力明顯提高(均P＜0.01),而β-半乳糖苷酶活性降低(均P＜0.01),CyclinD1 mRNA錶達降低(均P＜0.01),CDK4 mRNA錶達升高(均P＜0.01),p16INK4a錶達降低,Rb燐痠化增多(均P＜0.01),但兩組之間差異無統計學意義(均P＞0.05).結論 GLP可通過改變細胞週期調控因子CyclinD1/CDK4/p16INK4a進而調節Rb的燐痠化狀態,髮揮抗H2O2誘導的HDF細胞衰老作用.
목적 탐토불동제량령지다당(GLP)대항H2O2유도적HDF세포쇠로급가능적세포주기조공궤제.방법 장HDF세포배양지24대시분성6조:즉청년조、대조조、쇠로모형조급GLP소제량(50 mg/L)、중제량(100 mg/L)、대제량(150 mg/L)조,체외DMEM배양,각GLP조화쇠로모형조자30대시첨가 H2O2유도HDF세포쇠로,직지38대.채용MTT법검측세포활력;Dimri법검측β-반유당감매활성;RT-PCR법검측p16INK4a、CyclinD1、CDK4적표체;Western인적법검측Rb단백표체화린산화Rb.결과 여청년조급대조조비교,쇠로모형조세포활력하강(P＜0.01),β-반유당감매활성승고(P＜0.01),CyclinD1 mRNA표체승고(P＜0.01),CDK4 mRNA표체하강(P＜0.01),p16INK4a표체승고(P＜0.01),Rb린산화감소(P＜0.01);여쇠로모형조세포비교,중제량화대제량GLP세포활력명현제고(균P＜0.01),이β-반유당감매활성강저(균P＜0.01),CyclinD1 mRNA표체강저(균P＜0.01),CDK4 mRNA표체승고(균P＜0.01),p16INK4a표체강저,Rb린산화증다(균P＜0.01),단량조지간차이무통계학의의(균P＞0.05).결론 GLP가통과개변세포주기조공인자CyclinD1/CDK4/p16INK4a진이조절Rb적린산화상태,발휘항H2O2유도적HDF세포쇠로작용.
