临床泌尿外科杂志
臨床泌尿外科雜誌
림상비뇨외과잡지
JOURNAL OF CLINICAL UROLOGY
2010年
1期
53-57
,共5页
胡威%陈志强%叶章群%夏宗禹%马杰锋%夏丁%朱珉%陈刚
鬍威%陳誌彊%葉章群%夏宗禹%馬傑鋒%夏丁%硃珉%陳剛
호위%진지강%협장군%하종우%마걸봉%하정%주민%진강
RNA干扰%小干扰RNA%Ppif基因%大鼠肾细胞
RNA榦擾%小榦擾RNA%Ppif基因%大鼠腎細胞
RNA간우%소간우RNA%Ppif기인%대서신세포
目的:应用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制大鼠基因Ppif的表达,探讨其对大鼠肾细胞(NRK)增殖和凋亡的影响.方法:体外化学合成针对Ppif基因的siRNA序列,在脂质体介导下转染NRK细胞.RT-PCR检测Ppif mRNA表达水平,Western blot检测Ppif蛋白表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡状况,MTT法检测细胞增殖活性.结果:Ppif siRNA转染NRK细胞24 h后,所设计的3对针对不同靶点的siRNA与对照组相比,起始于405、556位点的siRNA在基因水平对Ppif无明显抑制效应(P>0.05);起始于198位点的siRNA在基因和蛋白水平均有明显的抑制效应,基因水平下降75.25%(P<0.05);蛋白水平下降72.13%(P<0.05).MTT结果显示NRK细胞增殖能力显著增加.转染24 h后,siRNAl～siRNA4细胞抑制率分别为(68.6±3.6)%、(5.3±4.3)oA、(7.6±6.3)%和(4.1±4.5)%,凋亡率明显下降.结论:体外化学合成的Ppif siRNA (起始于198位点)可以有效地抑制NRK细胞Ppif的表达,从而抑制细胞凋亡,促进细胞增殖.
目的:應用小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)抑製大鼠基因Ppif的錶達,探討其對大鼠腎細胞(NRK)增殖和凋亡的影響.方法:體外化學閤成針對Ppif基因的siRNA序列,在脂質體介導下轉染NRK細胞.RT-PCR檢測Ppif mRNA錶達水平,Western blot檢測Ppif蛋白錶達水平,流式細胞儀檢測細胞凋亡狀況,MTT法檢測細胞增殖活性.結果:Ppif siRNA轉染NRK細胞24 h後,所設計的3對針對不同靶點的siRNA與對照組相比,起始于405、556位點的siRNA在基因水平對Ppif無明顯抑製效應(P>0.05);起始于198位點的siRNA在基因和蛋白水平均有明顯的抑製效應,基因水平下降75.25%(P<0.05);蛋白水平下降72.13%(P<0.05).MTT結果顯示NRK細胞增殖能力顯著增加.轉染24 h後,siRNAl～siRNA4細胞抑製率分彆為(68.6±3.6)%、(5.3±4.3)oA、(7.6±6.3)%和(4.1±4.5)%,凋亡率明顯下降.結論:體外化學閤成的Ppif siRNA (起始于198位點)可以有效地抑製NRK細胞Ppif的錶達,從而抑製細胞凋亡,促進細胞增殖.
목적:응용소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)억제대서기인Ppif적표체,탐토기대대서신세포(NRK)증식화조망적영향.방법:체외화학합성침대Ppif기인적siRNA서렬,재지질체개도하전염NRK세포.RT-PCR검측Ppif mRNA표체수평,Western blot검측Ppif단백표체수평,류식세포의검측세포조망상황,MTT법검측세포증식활성.결과:Ppif siRNA전염NRK세포24 h후,소설계적3대침대불동파점적siRNA여대조조상비,기시우405、556위점적siRNA재기인수평대Ppif무명현억제효응(P>0.05);기시우198위점적siRNA재기인화단백수평균유명현적억제효응,기인수평하강75.25%(P<0.05);단백수평하강72.13%(P<0.05).MTT결과현시NRK세포증식능력현저증가.전염24 h후,siRNAl～siRNA4세포억제솔분별위(68.6±3.6)%、(5.3±4.3)oA、(7.6±6.3)%화(4.1±4.5)%,조망솔명현하강.결론:체외화학합성적Ppif siRNA (기시우198위점)가이유효지억제NRK세포Ppif적표체,종이억제세포조망,촉진세포증식.
