西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2010年
4期
37-41
,共5页
黄春旭%许信刚%童德文%王志昇%杜谦%唐麒麟%宁蓬勃
黃春旭%許信剛%童德文%王誌昇%杜謙%唐麒麟%寧蓬勃
황춘욱%허신강%동덕문%왕지승%두겸%당기린%저봉발
传染性法氏囊病病毒%VP2基因%基因克隆%序列分析%原核表达
傳染性法氏囊病病毒%VP2基因%基因剋隆%序列分析%原覈錶達
전염성법씨낭병병독%VP2기인%기인극륭%서렬분석%원핵표체
克隆、序列分析及原核表达鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因.根据GenBank已登录的IBDV VP2基因序列,设计合成一对VP2基因特异性引物,应用RT-PCR技术从陕西省某鸡场分离的IBDV毒株中克隆VP2基因并进行序列分析.再将VP2基因亚克隆于原核表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-32a-VP2,经鉴定正确后转化大肠杆菌BL21菌株进行诱导表达,并进行SDS-PAGE检测.成功克隆IBDV YL毒株VP2全基因序列,核苷酸和氨基酸序列分析表明,YL株为IBDV超强毒株.经IPTG诱导后, SDS-PAGE分析,在宿主菌BL21中成功表达约为53 ku 的VP2蛋白.IBDV VP2基因克隆表达成功,为IBDV的分子生物学特性研究提供资料,其表达产物为进一步制备抗IBDV单克隆抗体奠定了基础.
剋隆、序列分析及原覈錶達鷄傳染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因.根據GenBank已登錄的IBDV VP2基因序列,設計閤成一對VP2基因特異性引物,應用RT-PCR技術從陝西省某鷄場分離的IBDV毒株中剋隆VP2基因併進行序列分析.再將VP2基因亞剋隆于原覈錶達載體pET-32a中,構建重組質粒pET-32a-VP2,經鑒定正確後轉化大腸桿菌BL21菌株進行誘導錶達,併進行SDS-PAGE檢測.成功剋隆IBDV YL毒株VP2全基因序列,覈苷痠和氨基痠序列分析錶明,YL株為IBDV超彊毒株.經IPTG誘導後, SDS-PAGE分析,在宿主菌BL21中成功錶達約為53 ku 的VP2蛋白.IBDV VP2基因剋隆錶達成功,為IBDV的分子生物學特性研究提供資料,其錶達產物為進一步製備抗IBDV單剋隆抗體奠定瞭基礎.
극륭、서렬분석급원핵표체계전염성법씨낭병병독(IBDV)VP2기인.근거GenBank이등록적IBDV VP2기인서렬,설계합성일대VP2기인특이성인물,응용RT-PCR기술종합서성모계장분리적IBDV독주중극륭VP2기인병진행서렬분석.재장VP2기인아극륭우원핵표체재체pET-32a중,구건중조질립pET-32a-VP2,경감정정학후전화대장간균BL21균주진행유도표체,병진행SDS-PAGE검측.성공극륭IBDV YL독주VP2전기인서렬,핵감산화안기산서렬분석표명,YL주위IBDV초강독주.경IPTG유도후, SDS-PAGE분석,재숙주균BL21중성공표체약위53 ku 적VP2단백.IBDV VP2기인극륭표체성공,위IBDV적분자생물학특성연구제공자료,기표체산물위진일보제비항IBDV단극륭항체전정료기출.
