癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2011年
1期
4-8
,共5页
黄娟%袁建辉%杨淋清%柯跃斌
黃娟%袁建輝%楊淋清%柯躍斌
황연%원건휘%양림청%가약빈
慢病毒%RNA干扰%hOGG1%hMTH1
慢病毒%RNA榦擾%hOGG1%hMTH1
만병독%RNA간우%hOGG1%hMTH1
目的:分别建市8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1 (human 8-hydroxyguanine glycosylase,hOGG1)基因和8-羟基鸟嘌呤核苷酸酶(human Mut T homlogue,hMTH1)基因缺陷细胞模型,为进一步研究两个基因的相互关系提供理想的研究平台.方法:利用慢病毒载体介导的小发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA)转入人胚胎肾细胞(293FT)包装慢病毒,用所得到的慢病毒感染人胚肺成纤维细胞(HFL),杀稻瘟菌素筛选稳定表达的细胞株,荧光显微镜下观察慢病毒的包装效率和感染效率,Real-time RT-PCR鉴定基因干扰效果.结果:得到了滴度较高的慢病毒,感染靶细胞后得到hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型,hOGG1 mRNA和hMTH1mRNA表达水平分别比正常HFL细胞下降了90%和60%.结论:通过慢病毒包装技术,成功构建hOGG1基因和hMTH1基因缺陷细胞模型.
目的:分彆建市8-羥基鳥嘌呤糖苷酶1 (human 8-hydroxyguanine glycosylase,hOGG1)基因和8-羥基鳥嘌呤覈苷痠酶(human Mut T homlogue,hMTH1)基因缺陷細胞模型,為進一步研究兩箇基因的相互關繫提供理想的研究平檯.方法:利用慢病毒載體介導的小髮夾狀RNA(small hairpin RNA,shRNA)轉入人胚胎腎細胞(293FT)包裝慢病毒,用所得到的慢病毒感染人胚肺成纖維細胞(HFL),殺稻瘟菌素篩選穩定錶達的細胞株,熒光顯微鏡下觀察慢病毒的包裝效率和感染效率,Real-time RT-PCR鑒定基因榦擾效果.結果:得到瞭滴度較高的慢病毒,感染靶細胞後得到hOGG1基因和hMTH1基因缺陷細胞模型,hOGG1 mRNA和hMTH1mRNA錶達水平分彆比正常HFL細胞下降瞭90%和60%.結論:通過慢病毒包裝技術,成功構建hOGG1基因和hMTH1基因缺陷細胞模型.
목적:분별건시8-간기조표령당감매1 (human 8-hydroxyguanine glycosylase,hOGG1)기인화8-간기조표령핵감산매(human Mut T homlogue,hMTH1)기인결함세포모형,위진일보연구량개기인적상호관계제공이상적연구평태.방법:이용만병독재체개도적소발협상RNA(small hairpin RNA,shRNA)전입인배태신세포(293FT)포장만병독,용소득도적만병독감염인배폐성섬유세포(HFL),살도온균소사선은정표체적세포주,형광현미경하관찰만병독적포장효솔화감염효솔,Real-time RT-PCR감정기인간우효과.결과:득도료적도교고적만병독,감염파세포후득도hOGG1기인화hMTH1기인결함세포모형,hOGG1 mRNA화hMTH1mRNA표체수평분별비정상HFL세포하강료90%화60%.결론:통과만병독포장기술,성공구건hOGG1기인화hMTH1기인결함세포모형.
