中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2010年
10期
18-20
,共3页
罗锋%郭炳新%李国清%苏遂琴%梁刚%陈泽华
囉鋒%郭炳新%李國清%囌遂琴%樑剛%陳澤華
라봉%곽병신%리국청%소수금%량강%진택화
鸽毛滴虫%兔抗鸽IgG抗体-HRP%鸽抗鸽毛滴虫高免血清%Dot-ELISA
鴿毛滴蟲%兔抗鴿IgG抗體-HRP%鴿抗鴿毛滴蟲高免血清%Dot-ELISA
합모적충%토항합IgG항체-HRP%합항합모적충고면혈청%Dot-ELISA
为了制备兔抗鸽IgG抗体-HRP,建立斑点酶联免疫吸附试验定性检测鸽毛滴虫抗原的检测方法,将纯化的鸽IgG加入佐剂免疫兔子,获取纯化的兔抗鸽IgG抗体;采用简易过碘酸钠法标记兔抗鸽IgG,获取兔抗鸽IgG抗体-HRP;同时将鸽毛滴虫用超声波粉碎加入佐剂后多次免疫健康鸽获取鸽抗鸽毛滴虫高免血清(一抗);然后在2×106个/mL的鸽毛滴虫抗原量下,用不同浓度的一抗抗体、兔抗鸽IgG抗体-HRP进行试验;并对70个临床样品进行检测.结果显示,在2×106个/mL的鸽毛滴虫抗原量下,一抗与兔抗鸽IgG-HRP最佳工作浓度分别为1∶100和1∶500; 70个样品中,48个镜检为阳性的样品用Dot-ELISA检测有44个呈阳性,阳性符合率为91.7%;22个镜检为阴性的样品用Dot-ELISA检测有12个呈阴性,阴性符合率为54.5%;Dot-ELISA检测与镜检结果的总符合率为80%.结果表明,本试验成功地建立了鸽毛滴虫感染的Dot-ELISA检测方法.
為瞭製備兔抗鴿IgG抗體-HRP,建立斑點酶聯免疫吸附試驗定性檢測鴿毛滴蟲抗原的檢測方法,將純化的鴿IgG加入佐劑免疫兔子,穫取純化的兔抗鴿IgG抗體;採用簡易過碘痠鈉法標記兔抗鴿IgG,穫取兔抗鴿IgG抗體-HRP;同時將鴿毛滴蟲用超聲波粉碎加入佐劑後多次免疫健康鴿穫取鴿抗鴿毛滴蟲高免血清(一抗);然後在2×106箇/mL的鴿毛滴蟲抗原量下,用不同濃度的一抗抗體、兔抗鴿IgG抗體-HRP進行試驗;併對70箇臨床樣品進行檢測.結果顯示,在2×106箇/mL的鴿毛滴蟲抗原量下,一抗與兔抗鴿IgG-HRP最佳工作濃度分彆為1∶100和1∶500; 70箇樣品中,48箇鏡檢為暘性的樣品用Dot-ELISA檢測有44箇呈暘性,暘性符閤率為91.7%;22箇鏡檢為陰性的樣品用Dot-ELISA檢測有12箇呈陰性,陰性符閤率為54.5%;Dot-ELISA檢測與鏡檢結果的總符閤率為80%.結果錶明,本試驗成功地建立瞭鴿毛滴蟲感染的Dot-ELISA檢測方法.
위료제비토항합IgG항체-HRP,건립반점매련면역흡부시험정성검측합모적충항원적검측방법,장순화적합IgG가입좌제면역토자,획취순화적토항합IgG항체;채용간역과전산납법표기토항합IgG,획취토항합IgG항체-HRP;동시장합모적충용초성파분쇄가입좌제후다차면역건강합획취합항합모적충고면혈청(일항);연후재2×106개/mL적합모적충항원량하,용불동농도적일항항체、토항합IgG항체-HRP진행시험;병대70개림상양품진행검측.결과현시,재2×106개/mL적합모적충항원량하,일항여토항합IgG-HRP최가공작농도분별위1∶100화1∶500; 70개양품중,48개경검위양성적양품용Dot-ELISA검측유44개정양성,양성부합솔위91.7%;22개경검위음성적양품용Dot-ELISA검측유12개정음성,음성부합솔위54.5%;Dot-ELISA검측여경검결과적총부합솔위80%.결과표명,본시험성공지건립료합모적충감염적Dot-ELISA검측방법.
