生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
9期
120-124,141
,共6页
涡虫%DjPreb%RNA干扰%再生
渦蟲%DjPreb%RNA榦擾%再生
와충%DjPreb%RNA간우%재생
以含有东亚三角涡虫DjPreb基因的pcDNA3-DjPreb重组质粒为模板,经PCR扩增目的片段,将其克隆到干扰载体L4440上,构建重组质粒L4440-DjPreb后转化入大肠杆菌HT115感受态细胞中,IPTG诱导表达dsRNA后喂食涡虫.显微观察喂食dsRNA后的涡虫在再生过程中的表型变化,Real-time PCR检测载体对涡虫DjPreb基因的表达抑制效果.试验结果显示DjPreb基因的RNA干扰表达载体构建成功,DjPreb基因RNA干扰后涡虫不能正常再生.Real-time PCR分析饲喂RNA干扰食物后DjPrcb mRNA的表达显著下降,进一步说明DjPreb在涡虫头尾的形成中发挥作用.
以含有東亞三角渦蟲DjPreb基因的pcDNA3-DjPreb重組質粒為模闆,經PCR擴增目的片段,將其剋隆到榦擾載體L4440上,構建重組質粒L4440-DjPreb後轉化入大腸桿菌HT115感受態細胞中,IPTG誘導錶達dsRNA後餵食渦蟲.顯微觀察餵食dsRNA後的渦蟲在再生過程中的錶型變化,Real-time PCR檢測載體對渦蟲DjPreb基因的錶達抑製效果.試驗結果顯示DjPreb基因的RNA榦擾錶達載體構建成功,DjPreb基因RNA榦擾後渦蟲不能正常再生.Real-time PCR分析飼餵RNA榦擾食物後DjPrcb mRNA的錶達顯著下降,進一步說明DjPreb在渦蟲頭尾的形成中髮揮作用.
이함유동아삼각와충DjPreb기인적pcDNA3-DjPreb중조질립위모판,경PCR확증목적편단,장기극륭도간우재체L4440상,구건중조질립L4440-DjPreb후전화입대장간균HT115감수태세포중,IPTG유도표체dsRNA후위식와충.현미관찰위식dsRNA후적와충재재생과정중적표형변화,Real-time PCR검측재체대와충DjPreb기인적표체억제효과.시험결과현시DjPreb기인적RNA간우표체재체구건성공,DjPreb기인RNA간우후와충불능정상재생.Real-time PCR분석사위RNA간우식물후DjPrcb mRNA적표체현저하강,진일보설명DjPreb재와충두미적형성중발휘작용.
