山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
38期
25-27
,共3页
何晓鹏%毕研文%刘相燕%王洲%王静%梁雪红%刘凡英
何曉鵬%畢研文%劉相燕%王洲%王靜%樑雪紅%劉凡英
하효붕%필연문%류상연%왕주%왕정%량설홍%류범영
核转录因子-κB%RNA干扰%小分子干扰RNA%内皮细胞%细胞增殖
覈轉錄因子-κB%RNA榦擾%小分子榦擾RNA%內皮細胞%細胞增殖
핵전록인자-κB%RNA간우%소분자간우RNA%내피세포%세포증식
目的 观察内皮细胞的核转录因子( NF)-κB信号通路阻断对内皮细胞增殖的抑制作用.方法 构建NF-κB p65的特异性小分子干扰RNA(siRNA)真核表达载体.取体外培养的大鼠主动脉内皮细胞(SVAREC细胞),随机分为空白对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+ HK组和LPS+ p65 siRNA组.除空白对照组外,均予1μg/mlLPS诱导孵育.LPS+ HK组和LPS+ p65 siRNA组分别转染无义序列HK和p65 siRNA真核表达载体.继续培养72 h后用Western blot法检测各组细胞p65蛋白,流式细胞术测算细胞周期,MTT法测算内皮细胞增殖指数及细胞增殖率.结果 NF-κB p65蛋白表达水平量LPS组为0.913±0.073,较空白对照组0.527±0.053明显增高(P＜0.05)；LPS+HK组为0.926±0.065,与LPS组相比P＞0.05,LPS+ p65 siRNA组为0.473±0.071,与LPS组相比P＜0.05.LPS组G0/G1期细胞比例较空白对照组显著降低、S期细胞比例、细胞增殖指数及细胞增值率较对照组显著增高(P均＜0.05)；LPS +p65 siRNA组细胞与LPS组相比G0/G1期比例显著增高,S期细胞比例、细胞增殖指数及细胞增殖率显著降低(P均＜0.05),而LPS+ HK组与LPS组比较P均＞0.05.结论 NF-κB信号传导通路阻断可抑制内皮细胞增殖.
目的 觀察內皮細胞的覈轉錄因子( NF)-κB信號通路阻斷對內皮細胞增殖的抑製作用.方法 構建NF-κB p65的特異性小分子榦擾RNA(siRNA)真覈錶達載體.取體外培養的大鼠主動脈內皮細胞(SVAREC細胞),隨機分為空白對照組、脂多糖(LPS)組、LPS+ HK組和LPS+ p65 siRNA組.除空白對照組外,均予1μg/mlLPS誘導孵育.LPS+ HK組和LPS+ p65 siRNA組分彆轉染無義序列HK和p65 siRNA真覈錶達載體.繼續培養72 h後用Western blot法檢測各組細胞p65蛋白,流式細胞術測算細胞週期,MTT法測算內皮細胞增殖指數及細胞增殖率.結果 NF-κB p65蛋白錶達水平量LPS組為0.913±0.073,較空白對照組0.527±0.053明顯增高(P＜0.05)；LPS+HK組為0.926±0.065,與LPS組相比P＞0.05,LPS+ p65 siRNA組為0.473±0.071,與LPS組相比P＜0.05.LPS組G0/G1期細胞比例較空白對照組顯著降低、S期細胞比例、細胞增殖指數及細胞增值率較對照組顯著增高(P均＜0.05)；LPS +p65 siRNA組細胞與LPS組相比G0/G1期比例顯著增高,S期細胞比例、細胞增殖指數及細胞增殖率顯著降低(P均＜0.05),而LPS+ HK組與LPS組比較P均＞0.05.結論 NF-κB信號傳導通路阻斷可抑製內皮細胞增殖.
목적 관찰내피세포적핵전록인자( NF)-κB신호통로조단대내피세포증식적억제작용.방법 구건NF-κB p65적특이성소분자간우RNA(siRNA)진핵표체재체.취체외배양적대서주동맥내피세포(SVAREC세포),수궤분위공백대조조、지다당(LPS)조、LPS+ HK조화LPS+ p65 siRNA조.제공백대조조외,균여1μg/mlLPS유도부육.LPS+ HK조화LPS+ p65 siRNA조분별전염무의서렬HK화p65 siRNA진핵표체재체.계속배양72 h후용Western blot법검측각조세포p65단백,류식세포술측산세포주기,MTT법측산내피세포증식지수급세포증식솔.결과 NF-κB p65단백표체수평량LPS조위0.913±0.073,교공백대조조0.527±0.053명현증고(P＜0.05)；LPS+HK조위0.926±0.065,여LPS조상비P＞0.05,LPS+ p65 siRNA조위0.473±0.071,여LPS조상비P＜0.05.LPS조G0/G1기세포비례교공백대조조현저강저、S기세포비례、세포증식지수급세포증치솔교대조조현저증고(P균＜0.05)；LPS +p65 siRNA조세포여LPS조상비G0/G1기비례현저증고,S기세포비례、세포증식지수급세포증식솔현저강저(P균＜0.05),이LPS+ HK조여LPS조비교P균＞0.05.결론 NF-κB신호전도통로조단가억제내피세포증식.
