中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2007年
41期
2925-2928
,共4页
姜林娣%王汉洲%赵凤娣%郭津生%鲍春德%邹和建%王吉耀
薑林娣%王漢洲%趙鳳娣%郭津生%鮑春德%鄒和建%王吉耀
강림제%왕한주%조봉제%곽진생%포춘덕%추화건%왕길요
关节炎,类风湿%成纤维细胞%环氧化酶
關節炎,類風濕%成纖維細胞%環氧化酶
관절염,류풍습%성섬유세포%배양화매
目的 分析siRNA对前列腺素E2(PGE2)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)合成的影响.方法 设计4条(1#～4#)环氧化酶-2(hCOX-2)mRNA的小分子干扰RNA(siRNA),设立空白阴性(CTL)和1条随机序列(NC)对照.应用LipofectAMINE 2000将siRNA转染入滑膜成纤维细胞(RASF),4 h后,再加入100 nmol/L的佛波酯.应用RT-PCR和Western印迹分别检测hCOX-2 mRNA和蛋白表达水平.采用ELISA法检测各组上清液中致炎因子水平.结果 转染48 h后,NC、1#～4# siRNA组与CTL组mRNA条带吸光度比值分别为0.72、0.3、0.25、0.4、0.04.转染36和48 h后,各组与CTL组hCOX-2蛋白吸光度比值分别为1.04、0.52、0.39、0.9、0和1.05、0.52、0.51、0.9、0.15;4# siRNA组上清液PGE2、IL-1β、TNF-α、IL-6和VEGF水平较其他各组为低,且与其他处理组相比死亡细胞率差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 4#iRNA组能有效抑制COX-2mRNA和蛋白表达,其上清液中致炎因子水平最低,死亡细胞较其他各组无明显增加.
目的 分析siRNA對前列腺素E2(PGE2)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、腫瘤壞死因子(TNF-α)和血管內皮生長因子(VEGF)閤成的影響.方法 設計4條(1#～4#)環氧化酶-2(hCOX-2)mRNA的小分子榦擾RNA(siRNA),設立空白陰性(CTL)和1條隨機序列(NC)對照.應用LipofectAMINE 2000將siRNA轉染入滑膜成纖維細胞(RASF),4 h後,再加入100 nmol/L的彿波酯.應用RT-PCR和Western印跡分彆檢測hCOX-2 mRNA和蛋白錶達水平.採用ELISA法檢測各組上清液中緻炎因子水平.結果 轉染48 h後,NC、1#～4# siRNA組與CTL組mRNA條帶吸光度比值分彆為0.72、0.3、0.25、0.4、0.04.轉染36和48 h後,各組與CTL組hCOX-2蛋白吸光度比值分彆為1.04、0.52、0.39、0.9、0和1.05、0.52、0.51、0.9、0.15;4# siRNA組上清液PGE2、IL-1β、TNF-α、IL-6和VEGF水平較其他各組為低,且與其他處理組相比死亡細胞率差異無統計學意義(P均＞0.05).結論 4#iRNA組能有效抑製COX-2mRNA和蛋白錶達,其上清液中緻炎因子水平最低,死亡細胞較其他各組無明顯增加.
목적 분석siRNA대전렬선소E2(PGE2)、백개소-1β(IL-1β)、IL-6、종류배사인자(TNF-α)화혈관내피생장인자(VEGF)합성적영향.방법 설계4조(1#～4#)배양화매-2(hCOX-2)mRNA적소분자간우RNA(siRNA),설립공백음성(CTL)화1조수궤서렬(NC)대조.응용LipofectAMINE 2000장siRNA전염입활막성섬유세포(RASF),4 h후,재가입100 nmol/L적불파지.응용RT-PCR화Western인적분별검측hCOX-2 mRNA화단백표체수평.채용ELISA법검측각조상청액중치염인자수평.결과 전염48 h후,NC、1#～4# siRNA조여CTL조mRNA조대흡광도비치분별위0.72、0.3、0.25、0.4、0.04.전염36화48 h후,각조여CTL조hCOX-2단백흡광도비치분별위1.04、0.52、0.39、0.9、0화1.05、0.52、0.51、0.9、0.15;4# siRNA조상청액PGE2、IL-1β、TNF-α、IL-6화VEGF수평교기타각조위저,차여기타처리조상비사망세포솔차이무통계학의의(P균＞0.05).결론 4#iRNA조능유효억제COX-2mRNA화단백표체,기상청액중치염인자수평최저,사망세포교기타각조무명현증가.
