中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2005年
27期
1885-1889
,共5页
李海红%付小兵%周岗%费沛%陈伟%白晓东%蔡存良%孙同柱
李海紅%付小兵%週崗%費沛%陳偉%白曉東%蔡存良%孫同柱
리해홍%부소병%주강%비패%진위%백효동%채존량%손동주
干细胞%汗腺%共同培养%细胞融合%细胞分化
榦細胞%汗腺%共同培養%細胞融閤%細胞分化
간세포%한선%공동배양%세포융합%세포분화
目的研究人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells, hMSCs)在体外与损伤的人汗腺细胞(human sweat gland cells, hSGCs)共培养时的转化情况.方法体外分别分离培养和扩增hMSCs和hSGCs,用二步免疫细胞化学法检测hMSCs和hSGCs抗原表达情况.用5 μmol/L的5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)对培养的hMSCs进行连续培养标记.待原代培养的hSGCs达70%融合后,给予47℃高温处理40 min造成热损伤体外模型,37℃冷却1-2 h,然后加入(1-2)×105 BrdU标记的hMSCs共同培养,2周后,以抗癌胚抗原(CEA)和抗BrdU单克隆抗体作为一抗,采用免疫细胞化学双染法检测共培养的细胞.结果 hMSCs 和hSGCs均呈克隆样生长, hMSCs表达CD44和CD105,不表达CD34和CEA;hSGCs表达CK7、CK8、CK19、CEA.用BrdU 标记hMSCs 阳性率可达90%,hSGCs经高温损伤后,大多数细胞的细胞间连接消失.共培养2周后,部分细胞同时表达CEA和BrdU,并有多核现象.细胞染色示双染细胞可达1%～5%,多核细胞且核染色不同的细胞约为0.01%～0.05%,多核细胞与其他双染细胞相比,细胞明显的宽大扁平.结论在损伤的微环境下,hMSCs可以向hSGCs转化,其机制可能是细胞分化、细胞融合甚至是核融合.
目的研究人骨髓間充質榦細胞(human mesenchymal stem cells, hMSCs)在體外與損傷的人汗腺細胞(human sweat gland cells, hSGCs)共培養時的轉化情況.方法體外分彆分離培養和擴增hMSCs和hSGCs,用二步免疫細胞化學法檢測hMSCs和hSGCs抗原錶達情況.用5 μmol/L的5-溴-2-脫氧尿苷(BrdU)對培養的hMSCs進行連續培養標記.待原代培養的hSGCs達70%融閤後,給予47℃高溫處理40 min造成熱損傷體外模型,37℃冷卻1-2 h,然後加入(1-2)×105 BrdU標記的hMSCs共同培養,2週後,以抗癌胚抗原(CEA)和抗BrdU單剋隆抗體作為一抗,採用免疫細胞化學雙染法檢測共培養的細胞.結果 hMSCs 和hSGCs均呈剋隆樣生長, hMSCs錶達CD44和CD105,不錶達CD34和CEA;hSGCs錶達CK7、CK8、CK19、CEA.用BrdU 標記hMSCs 暘性率可達90%,hSGCs經高溫損傷後,大多數細胞的細胞間連接消失.共培養2週後,部分細胞同時錶達CEA和BrdU,併有多覈現象.細胞染色示雙染細胞可達1%～5%,多覈細胞且覈染色不同的細胞約為0.01%～0.05%,多覈細胞與其他雙染細胞相比,細胞明顯的寬大扁平.結論在損傷的微環境下,hMSCs可以嚮hSGCs轉化,其機製可能是細胞分化、細胞融閤甚至是覈融閤.
목적연구인골수간충질간세포(human mesenchymal stem cells, hMSCs)재체외여손상적인한선세포(human sweat gland cells, hSGCs)공배양시적전화정황.방법체외분별분리배양화확증hMSCs화hSGCs,용이보면역세포화학법검측hMSCs화hSGCs항원표체정황.용5 μmol/L적5-추-2-탈양뇨감(BrdU)대배양적hMSCs진행련속배양표기.대원대배양적hSGCs체70%융합후,급여47℃고온처리40 min조성열손상체외모형,37℃냉각1-2 h,연후가입(1-2)×105 BrdU표기적hMSCs공동배양,2주후,이항암배항원(CEA)화항BrdU단극륭항체작위일항,채용면역세포화학쌍염법검측공배양적세포.결과 hMSCs 화hSGCs균정극륭양생장, hMSCs표체CD44화CD105,불표체CD34화CEA;hSGCs표체CK7、CK8、CK19、CEA.용BrdU 표기hMSCs 양성솔가체90%,hSGCs경고온손상후,대다수세포적세포간련접소실.공배양2주후,부분세포동시표체CEA화BrdU,병유다핵현상.세포염색시쌍염세포가체1%～5%,다핵세포차핵염색불동적세포약위0.01%～0.05%,다핵세포여기타쌍염세포상비,세포명현적관대편평.결론재손상적미배경하,hMSCs가이향hSGCs전화,기궤제가능시세포분화、세포융합심지시핵융합.
