农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2006年
5期
657-661
,共5页
黄玉海%汪以真%单体中%刘建新%冯杰
黃玉海%汪以真%單體中%劉建新%馮傑
황옥해%왕이진%단체중%류건신%풍걸
猪%心型脂肪酸结合蛋白基因%基因克隆%基因表达
豬%心型脂肪痠結閤蛋白基因%基因剋隆%基因錶達
저%심형지방산결합단백기인%기인극륭%기인표체
从1,30,50,70和90kg左右的杜长大猪肌肉组织中提取基因组RNA,用RT-PCR扩增猪心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因,获得1条211 bp的片段,以pGEM-T为载体,将该基因片段克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α中.从筛选到的阳性克隆中分离出脂肪酸结合蛋白基因,测定其序列.分析表明,该片段为脂肪酸结合蛋白基因cDNA的部分序列,与已报道的猪肌肉组织中的H-FABP cDNA部分序列同源性达到99%.以H-FABP基因片段的克隆为基础,构建了优化的半定量RT-PCR法,以18S rRNA为内标,研究不同生长阶段猪肌肉组织中H-FABP基因表达的差异.结果表明,从出生到50 kg,猪H-FABP基因表达呈下降趋势;50～90 kg阶段,H-FABP基因的表达又有所上升.
從1,30,50,70和90kg左右的杜長大豬肌肉組織中提取基因組RNA,用RT-PCR擴增豬心型脂肪痠結閤蛋白(H-FABP)基因,穫得1條211 bp的片段,以pGEM-T為載體,將該基因片段剋隆到大腸桿菌(Escherichia coli)DH5α中.從篩選到的暘性剋隆中分離齣脂肪痠結閤蛋白基因,測定其序列.分析錶明,該片段為脂肪痠結閤蛋白基因cDNA的部分序列,與已報道的豬肌肉組織中的H-FABP cDNA部分序列同源性達到99%.以H-FABP基因片段的剋隆為基礎,構建瞭優化的半定量RT-PCR法,以18S rRNA為內標,研究不同生長階段豬肌肉組織中H-FABP基因錶達的差異.結果錶明,從齣生到50 kg,豬H-FABP基因錶達呈下降趨勢;50～90 kg階段,H-FABP基因的錶達又有所上升.
종1,30,50,70화90kg좌우적두장대저기육조직중제취기인조RNA,용RT-PCR확증저심형지방산결합단백(H-FABP)기인,획득1조211 bp적편단,이pGEM-T위재체,장해기인편단극륭도대장간균(Escherichia coli)DH5α중.종사선도적양성극륭중분리출지방산결합단백기인,측정기서렬.분석표명,해편단위지방산결합단백기인cDNA적부분서렬,여이보도적저기육조직중적H-FABP cDNA부분서렬동원성체도99%.이H-FABP기인편단적극륭위기출,구건료우화적반정량RT-PCR법,이18S rRNA위내표,연구불동생장계단저기육조직중H-FABP기인표체적차이.결과표명,종출생도50 kg,저H-FABP기인표체정하강추세;50～90 kg계단,H-FABP기인적표체우유소상승.
