中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
189-193
,共5页
刘红军%吴祖泽%毕建进%李庆芳%王立生
劉紅軍%吳祖澤%畢建進%李慶芳%王立生
류홍군%오조택%필건진%리경방%왕립생
肝细胞生长因子%黏连%手术后并发症%质粒%间皮细胞
肝細胞生長因子%黏連%手術後併髮癥%質粒%間皮細胞
간세포생장인자%점련%수술후병발증%질립%간피세포
目的 观察质粒DNA在大鼠术后肠黏连模型中的表达效率及肝细胞生长因子(HGF)基因转移对术后肠黏连的预防作用.方法 以pcDNA3-HGF转染CHO细胞24 h后收集培养上清,用ELISA测定培养上清中HGF的浓度;取培养的大鼠腹膜间皮细胞作划痕试验,观察表达HGF的培养上清对间皮细胞迁移的影响.利用无菌干纱布擦伤盲肠的方法建立Wistar大鼠术后肠黏连模型,将模型大鼠随机分为5组,每组10只.其中4组分别于创面涂布pcDNA3-HGF 10、50、100和200 μg,1组于创面涂布绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒pcDNA3-GFP 200 μg作为对照.术后第2、14天分别解剖pcDNA3-GFP 200 μg组大鼠各2只取腹膜组织,荧光显微镜下观察GFP的表达;术后第14天解剖各组动物,观察肠黏连的发生情况.结果 pcDNA3-HGF质粒转染CHO细胞后24 h培养上清的HGF浓度达40 ng/ml,该上清能够促进大鼠腹膜间皮细胞的迁移.pcDNA3-GFP 200 μg组大鼠术后第2天腹膜组织中观察到GFP的表达,并持续到术后第14天.术后第14天各组大鼠中均有发生不同程度肠黏连者,pcDNA3-HGF 10、50、100和200 μg组和pcDNA3-GFP 200 μg组大鼠肠黏连发生率分别为9/10、7/10、6/10、4/10和9/10,其中重度(3～4度)肠黏连发生率分别为5/10、5/10、2/10、3/10、7/10,pcDNA3-HGF对术后肠黏连的预防效果呈一定的量效关系.结论 质粒DNA能有效转染损伤腹膜并介导外源基因表达;质粒载体介导HGF基因转移是预防术后肠黏连的有效手段.
目的 觀察質粒DNA在大鼠術後腸黏連模型中的錶達效率及肝細胞生長因子(HGF)基因轉移對術後腸黏連的預防作用.方法 以pcDNA3-HGF轉染CHO細胞24 h後收集培養上清,用ELISA測定培養上清中HGF的濃度;取培養的大鼠腹膜間皮細胞作劃痕試驗,觀察錶達HGF的培養上清對間皮細胞遷移的影響.利用無菌榦紗佈抆傷盲腸的方法建立Wistar大鼠術後腸黏連模型,將模型大鼠隨機分為5組,每組10隻.其中4組分彆于創麵塗佈pcDNA3-HGF 10、50、100和200 μg,1組于創麵塗佈綠色熒光蛋白(GFP)錶達質粒pcDNA3-GFP 200 μg作為對照.術後第2、14天分彆解剖pcDNA3-GFP 200 μg組大鼠各2隻取腹膜組織,熒光顯微鏡下觀察GFP的錶達;術後第14天解剖各組動物,觀察腸黏連的髮生情況.結果 pcDNA3-HGF質粒轉染CHO細胞後24 h培養上清的HGF濃度達40 ng/ml,該上清能夠促進大鼠腹膜間皮細胞的遷移.pcDNA3-GFP 200 μg組大鼠術後第2天腹膜組織中觀察到GFP的錶達,併持續到術後第14天.術後第14天各組大鼠中均有髮生不同程度腸黏連者,pcDNA3-HGF 10、50、100和200 μg組和pcDNA3-GFP 200 μg組大鼠腸黏連髮生率分彆為9/10、7/10、6/10、4/10和9/10,其中重度(3～4度)腸黏連髮生率分彆為5/10、5/10、2/10、3/10、7/10,pcDNA3-HGF對術後腸黏連的預防效果呈一定的量效關繫.結論 質粒DNA能有效轉染損傷腹膜併介導外源基因錶達;質粒載體介導HGF基因轉移是預防術後腸黏連的有效手段.
목적 관찰질립DNA재대서술후장점련모형중적표체효솔급간세포생장인자(HGF)기인전이대술후장점련적예방작용.방법 이pcDNA3-HGF전염CHO세포24 h후수집배양상청,용ELISA측정배양상청중HGF적농도;취배양적대서복막간피세포작화흔시험,관찰표체HGF적배양상청대간피세포천이적영향.이용무균간사포찰상맹장적방법건립Wistar대서술후장점련모형,장모형대서수궤분위5조,매조10지.기중4조분별우창면도포pcDNA3-HGF 10、50、100화200 μg,1조우창면도포록색형광단백(GFP)표체질립pcDNA3-GFP 200 μg작위대조.술후제2、14천분별해부pcDNA3-GFP 200 μg조대서각2지취복막조직,형광현미경하관찰GFP적표체;술후제14천해부각조동물,관찰장점련적발생정황.결과 pcDNA3-HGF질립전염CHO세포후24 h배양상청적HGF농도체40 ng/ml,해상청능구촉진대서복막간피세포적천이.pcDNA3-GFP 200 μg조대서술후제2천복막조직중관찰도GFP적표체,병지속도술후제14천.술후제14천각조대서중균유발생불동정도장점련자,pcDNA3-HGF 10、50、100화200 μg조화pcDNA3-GFP 200 μg조대서장점련발생솔분별위9/10、7/10、6/10、4/10화9/10,기중중도(3～4도)장점련발생솔분별위5/10、5/10、2/10、3/10、7/10,pcDNA3-HGF대술후장점련적예방효과정일정적량효관계.결론 질립DNA능유효전염손상복막병개도외원기인표체;질립재체개도HGF기인전이시예방술후장점련적유효수단.
