毒理学杂志
毒理學雜誌
독이학잡지
JOURNAL OF HEALTH TOXICOLOGY
2008年
6期
431-434
,共4页
肿瘤坏死因子α%内质网应激%GRP78%XBP-1
腫瘤壞死因子α%內質網應激%GRP78%XBP-1
종류배사인자α%내질망응격%GRP78%XBP-1
目的 研究肿瘤坏死因子α(TNFα)对小鼠纤维母细胞(L929)中葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)、X盒结合蛋白1(X box binding protein 1,XBP-1)表达的影响,探讨TNFα信号传导通路与内质网应激的相关性.方法 体外培养L929细胞,分别用TNFα、Tunlcamycin作用0、2、4、6、8和10 h,以Western Blot、Northern Blot检测内质网应激的标志分子:GRP78蛋白的表达,以及非折叠蛋白反应中的关键分子:XBP-1蛋白及mRNA水平表达;用RT-PCR结合Pst1酶切法检测XBP-1 mRNA的剪接作用.结果 TNFα作用于L929细胞即可以引起GRP78蛋白、XBP-1蛋白及XBP-1mBNA表达的升高,又可以诱导XBP-1mRNA的剪接作用;且这些分子表达的升高及mRNA的剪接作用均发生在TNFα作用的早期(开始于TNFα作用的2 h,4 h达到高峰,6 h后逐渐减弱).结论 TNFα作用于L929细胞可以诱导内质网应激,由此引起的活化转录因子6(activating transcription factor6,ATF6)、ER转膜蛋白激酶1(inositol-requiring enzyme 1,IBE1)介导的未折叠蛋白反应对细胞具有促生存作用.
目的 研究腫瘤壞死因子α(TNFα)對小鼠纖維母細胞(L929)中葡萄糖調節蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)、X盒結閤蛋白1(X box binding protein 1,XBP-1)錶達的影響,探討TNFα信號傳導通路與內質網應激的相關性.方法 體外培養L929細胞,分彆用TNFα、Tunlcamycin作用0、2、4、6、8和10 h,以Western Blot、Northern Blot檢測內質網應激的標誌分子:GRP78蛋白的錶達,以及非摺疊蛋白反應中的關鍵分子:XBP-1蛋白及mRNA水平錶達;用RT-PCR結閤Pst1酶切法檢測XBP-1 mRNA的剪接作用.結果 TNFα作用于L929細胞即可以引起GRP78蛋白、XBP-1蛋白及XBP-1mBNA錶達的升高,又可以誘導XBP-1mRNA的剪接作用;且這些分子錶達的升高及mRNA的剪接作用均髮生在TNFα作用的早期(開始于TNFα作用的2 h,4 h達到高峰,6 h後逐漸減弱).結論 TNFα作用于L929細胞可以誘導內質網應激,由此引起的活化轉錄因子6(activating transcription factor6,ATF6)、ER轉膜蛋白激酶1(inositol-requiring enzyme 1,IBE1)介導的未摺疊蛋白反應對細胞具有促生存作用.
목적 연구종류배사인자α(TNFα)대소서섬유모세포(L929)중포도당조절단백78(glucose regulated protein78,GRP78)、X합결합단백1(X box binding protein 1,XBP-1)표체적영향,탐토TNFα신호전도통로여내질망응격적상관성.방법 체외배양L929세포,분별용TNFα、Tunlcamycin작용0、2、4、6、8화10 h,이Western Blot、Northern Blot검측내질망응격적표지분자:GRP78단백적표체,이급비절첩단백반응중적관건분자:XBP-1단백급mRNA수평표체;용RT-PCR결합Pst1매절법검측XBP-1 mRNA적전접작용.결과 TNFα작용우L929세포즉가이인기GRP78단백、XBP-1단백급XBP-1mBNA표체적승고,우가이유도XBP-1mRNA적전접작용;차저사분자표체적승고급mRNA적전접작용균발생재TNFα작용적조기(개시우TNFα작용적2 h,4 h체도고봉,6 h후축점감약).결론 TNFα작용우L929세포가이유도내질망응격,유차인기적활화전록인자6(activating transcription factor6,ATF6)、ER전막단백격매1(inositol-requiring enzyme 1,IBE1)개도적미절첩단백반응대세포구유촉생존작용.
