CAJ | 학술논문

目的:研究特异性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对人胃癌细胞株MKN-45是否有抑制增殖、诱导凋亡作用并初步探讨其作用机制.方法:采用四氮唑盐比色法(MTT法)观察细胞增殖活力改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期变化; 透射电镜观察细胞超微结构的改变; DNA提取行琼脂糖凝胶电泳观察DNA的"梯状"条带;免疫组化观察bcl-2基因和bax基因表达情况.结果:MTT法显示随着塞来昔布浓度和作用时间增加,细胞抑制率上升.人胃癌细胞株MKN-45在25、50、75、100μmol/L塞来昔布浓度下,24小时细胞抑制率分别为(16.39±1.430%、(23.55±0.11)%、(62.78±1.42)%、(87.53±0.27)%,48小时细胞抑制率分别为 (30.40±0.68)%、(46.18±1.80)%、(89.77±0.21)%、(97.94±0.18)%,(P＜0.05);流式细胞仪测定塞来昔布组出现凋亡峰,50、100μmol/ml浓度的塞来昔布干预24小时后,人胃癌细胞株MKN-45凋亡率分别为(25.5±2.66)%、(57.23±2.19)%;透射电镜观察显示塞来昔布组细胞呈凋亡表现,核固缩、碎裂,染色质浓缩,边集;塞来昔布(50μmol/L、100μmol/L)组培养48小时后DNA琼脂糖凝胶电泳可见典型的梯状条带,而对照组细胞DNA 未见梯状条带;免疫细胞化学法显示经塞来昔布干预后,凋亡蛋白Bax表达增加,而Bcl-2 表达减少,并随时间和药物浓度变化而明显.结论:塞来昔布呈剂量、时间依赖性地抑制MKN-45细胞增殖,促进MKN-45细胞凋亡.其机制之一可能是通过减少Bcl-2的表达、增加Bax的表达,从而启动细胞凋亡途径.
목적:연구특이성배양화매-2(COX-2)억제제새래석포대인위암세포주MKN-45시부유억제증식、유도조망작용병초보탐토기작용궤제.방법:채용사담서염비색법(MTT법)관찰세포증식활력개변;류식세포의검측세포조망솔급세포주기변화; 투사전경관찰세포초미결구적개변; DNA제취행경지당응효전영관찰DNA적"제상"조대;면역조화관찰bcl-2기인화bax기인표체정황.결과:MTT법현시수착새래석포농도화작용시간증가,세포억제솔상승.인위암세포주MKN-45재25、50、75、100μmol/L새래석포농도하,24소시세포억제솔분별위(16.39±1.430%、(23.55±0.11)%、(62.78±1.42)%、(87.53±0.27)%,48소시세포억제솔분별위 (30.40±0.68)%、(46.18±1.80)%、(89.77±0.21)%、(97.94±0.18)%,(P＜0.05);류식세포의측정새래석포조출현조망봉,50、100μmol/ml농도적새래석포간예24소시후,인위암세포주MKN-45조망솔분별위(25.5±2.66)%、(57.23±2.19)%;투사전경관찰현시새래석포조세포정조망표현,핵고축、쇄렬,염색질농축,변집;새래석포(50μmol/L、100μmol/L)조배양48소시후DNA경지당응효전영가견전형적제상조대,이대조조세포DNA 미견제상조대;면역세포화학법현시경새래석포간예후,조망단백Bax표체증가,이Bcl-2 표체감소,병수시간화약물농도변화이명현.결론:새래석포정제량、시간의뢰성지억제MKN-45세포증식,촉진MKN-45세포조망.기궤제지일가능시통과감소Bcl-2적표체、증가Bax적표체,종이계동세포조망도경.