NF2基因突变体真核表达载体的构建和表达
NF2기인돌변체진핵표체재체적구건화표체
Construction of mutant NF2 eukaryotic expression vector and its expression
  • 万方数据
    浙江医学 절강의학
    ZHEJIANG MEDICAL JOURNAL
    2010年 8期 1209-1212,彩插1 ,共5页

    林亦海%卞留贯%薛跃华%孙青芳%贺子建%贺华%赵卫国%沈建康

    림역해%변류관%설약화%손청방%하자건%하화%조위국%침건강

    基因%增强型绿色荧光蛋白%真核表达 基因%增彊型綠色熒光蛋白%真覈錶達
    기인%증강형록색형광단백%진핵표체
    目的构建NF2突变体真核表达载体,并观察其在人胚肾细胞HEK293中的表达.方法采用分子生物学方法构建NF2突变体,将突变体克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,进行筛选和鉴定,然后在脂质体介导下,将重组载体转染至真核细胞HEK293中,应用Western blot法检测蛋白的表达.结果通过使用重叠延伸PCR法定位突变,从野生型NF2基因cDNA模板中扩增得到预期大小的NF2突变体条带,DNA测序证实NF2突变体序列的正确性.重组载体转染HEK293后能产生merlin蛋白.结论 本研究成功构建重组载体pEGFP-N1-NF2突变体,其转染HEK293后,能有效表达于HEK293中.
    목적구건NF2돌변체진핵표체재체,병관찰기재인배신세포HEK293중적표체.방법채용분자생물학방법구건NF2돌변체,장돌변체극륭입진핵표체재체pEGFP-N1중,진행사선화감정,연후재지질체개도하,장중조재체전염지진핵세포HEK293중,응용Western blot법검측단백적표체.결과통과사용중첩연신PCR법정위돌변,종야생형NF2기인cDNA모판중확증득도예기대소적NF2돌변체조대,DNA측서증실NF2돌변체서렬적정학성.중조재체전염HEK293후능산생merlin단백.결론 본연구성공구건중조재체pEGFP-N1-NF2돌변체,기전염HEK293후,능유효표체우HEK293중.
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