CAJ | 학술논문

目的:Bcl-2/Bax蛋白比值降低是辐射所致细胞凋亡启动的检查点.本研究拟用Bax反义核酸干预Bax基因的表达,提高Bcl-2/Bax蛋白比值,抑制辐射所致凋亡,促进细胞存活.方法:人胚肺成纤维细胞(HELF)和小鼠受γ射线照射后,立即用Bax反义脱氧寡核苷酸处理HELF细胞和小鼠骨髓细胞6?h(终浓度均为100?nmol/L),用MTT法、SRB法和小鼠骨髓中性粒细胞-巨噬细胞系祖细胞(CFU-GM)集落形成法,确定细胞的存活状况.用RT-PCR方法和流式细胞仪检测Bax mRNA的表达状况、细胞周期的变化,分析其作用机制.结果:HELF细胞的存活率分别增加24.4%(MTT法,P<0.01)和12.8%(SRB法,P<0.01);骨髓细胞处理组CFU-GM集落形成数量远高于照射对照(72±17 vs 13±6,P<0.01);RT-PCR检测显示,处理组的目标条带和内标条带的灰度比值(Bax/β-actin)低于对照组(分别为43.9%和68.6%);流式细胞仪检测表明,处理组总S期细胞的比例高于对照组,分别为24.2%和7.7%,提示处理组细胞内Bax mRNA拷贝数量低于对照组,细胞增殖活动较强.结论:靶向Bax mRNA的反义硫代脱氧寡核苷酸,能够促进γ射线辐射后细胞的存活,其机制与破坏靶mRNA分子,继而造成Bax蛋白表达减少,抑制凋亡启动并促进细胞增殖活动有关.
목적:Bcl-2/Bax단백비치강저시복사소치세포조망계동적검사점.본연구의용Bax반의핵산간예Bax기인적표체,제고Bcl-2/Bax단백비치,억제복사소치조망,촉진세포존활.방법:인배폐성섬유세포(HELF)화소서수γ사선조사후,립즉용Bax반의탈양과핵감산처리HELF세포화소서골수세포6?h(종농도균위100?nmol/L),용MTT법、SRB법화소서골수중성립세포-거서세포계조세포(CFU-GM)집락형성법,학정세포적존활상황.용RT-PCR방법화류식세포의검측Bax mRNA적표체상황、세포주기적변화,분석기작용궤제.결과:HELF세포적존활솔분별증가24.4%(MTT법,P<0.01)화12.8%(SRB법,P<0.01);골수세포처리조CFU-GM집락형성수량원고우조사대조(72±17 vs 13±6,P<0.01);RT-PCR검측현시,처리조적목표조대화내표조대적회도비치(Bax/β-actin)저우대조조(분별위43.9%화68.6%);류식세포의검측표명,처리조총S기세포적비례고우대조조,분별위24.2%화7.7%,제시처리조세포내Bax mRNA고패수량저우대조조,세포증식활동교강.결론:파향Bax mRNA적반의류대탈양과핵감산,능구촉진γ사선복사후세포적존활,기궤제여파배파mRNA분자,계이조성Bax단백표체감소,억제조망계동병촉진세포증식활동유관.