中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2001年
10期
559-562
,共4页
朱乃硕%陆敏依%于善谦%朱亚军%李勇
硃迺碩%陸敏依%于善謙%硃亞軍%李勇
주내석%륙민의%우선겸%주아군%리용
CTLA-4%基因表达%淋巴细胞转化实验
CTLA-4%基因錶達%淋巴細胞轉化實驗
CTLA-4%기인표체%림파세포전화실험
目的:构建CTLA-4基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中表达CTLA-4蛋白.方法:用PCR方法获得中国人CTLA-4基因第二外显子,构建重组表达质粒pPBCTLA,转化大肠杆菌DH5α,以PCR和RFLP方法筛选阳性克隆,以免疫印迹技术检测表达产物.结果: 阳性重组子在DH5α中经温度诱导可表达CTLA-4蛋白,分子量与理论值相符(约12 kD).进一步分析表明, CTLA-4蛋白主要以包涵体形式存在.Western-blot 结果证实,12 kD的表达条带可与标准羊抗人CTLA-4 IgG起特异反应.淋巴细胞转化实验结果表明该蛋白具有明显的免疫抑制作用.结论:用基因工程技术获得中国人CTLA-4基因表达蛋白,为进一步研究CTLA-4的生物学功能及研制抗CTLA-4抗体奠定了基础.
目的:構建CTLA-4基因錶達載體併在大腸桿菌DH5α中錶達CTLA-4蛋白.方法:用PCR方法穫得中國人CTLA-4基因第二外顯子,構建重組錶達質粒pPBCTLA,轉化大腸桿菌DH5α,以PCR和RFLP方法篩選暘性剋隆,以免疫印跡技術檢測錶達產物.結果: 暘性重組子在DH5α中經溫度誘導可錶達CTLA-4蛋白,分子量與理論值相符(約12 kD).進一步分析錶明, CTLA-4蛋白主要以包涵體形式存在.Western-blot 結果證實,12 kD的錶達條帶可與標準羊抗人CTLA-4 IgG起特異反應.淋巴細胞轉化實驗結果錶明該蛋白具有明顯的免疫抑製作用.結論:用基因工程技術穫得中國人CTLA-4基因錶達蛋白,為進一步研究CTLA-4的生物學功能及研製抗CTLA-4抗體奠定瞭基礎.
목적:구건CTLA-4기인표체재체병재대장간균DH5α중표체CTLA-4단백.방법:용PCR방법획득중국인CTLA-4기인제이외현자,구건중조표체질립pPBCTLA,전화대장간균DH5α,이PCR화RFLP방법사선양성극륭,이면역인적기술검측표체산물.결과: 양성중조자재DH5α중경온도유도가표체CTLA-4단백,분자량여이론치상부(약12 kD).진일보분석표명, CTLA-4단백주요이포함체형식존재.Western-blot 결과증실,12 kD적표체조대가여표준양항인CTLA-4 IgG기특이반응.림파세포전화실험결과표명해단백구유명현적면역억제작용.결론:용기인공정기술획득중국인CTLA-4기인표체단백,위진일보연구CTLA-4적생물학공능급연제항CTLA-4항체전정료기출.
