四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2005年
2期
161-164
,共4页
吴忠均%时德%骆旭东%李昱%谢海洋%郑树森
吳忠均%時德%駱旭東%李昱%謝海洋%鄭樹森
오충균%시덕%락욱동%리욱%사해양%정수삼
质粒%组织纤溶酶原激活物%血管内皮生长因子%血管平滑肌细胞
質粒%組織纖溶酶原激活物%血管內皮生長因子%血管平滑肌細胞
질립%조직섬용매원격활물%혈관내피생장인자%혈관평활기세포
目的构建携带人组织纤溶酶原激活物(tPA)和血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)基因的真核表达质粒pBudCE4.1/tPA-VEGF165,并观察其在血管平滑肌细胞(VSMC)中的表达.方法从人心脏组织中克隆tPA和VEGF165基因.将tPA和VEGF165基因克隆至真核表达质粒pBudCE4.1中,构建共表达质粒pBudCE4.1/tPA-VEGF165.将pBudCE4.1/tPA-VEGF165转染VSMC,用RT-PCR法检测转染的VSMC中tPA和VEGF165 mRNA的表达,用ELISA法检测转染的VSMC培养液中tPA和VEGF165蛋白质.结果人tPA和VEGF165基因的RT-PCR产物分别为1.9kb和576 bp.经酶切鉴定证实,tPA和VEGF165基因已克隆至真核表达质粒pBudCE4.1中.以其转染VSMC后,经RT-PCR和ELISA检测发现,tPA和VEGF165在mRNA和蛋白质水平均有表达.结论成功地构建了真核共表达质粒pBudCE4.1/tPA-VEGF165,并在VSMC中表达tPA和VEGF165.
目的構建攜帶人組織纖溶酶原激活物(tPA)和血管內皮細胞生長因子165(VEGF165)基因的真覈錶達質粒pBudCE4.1/tPA-VEGF165,併觀察其在血管平滑肌細胞(VSMC)中的錶達.方法從人心髒組織中剋隆tPA和VEGF165基因.將tPA和VEGF165基因剋隆至真覈錶達質粒pBudCE4.1中,構建共錶達質粒pBudCE4.1/tPA-VEGF165.將pBudCE4.1/tPA-VEGF165轉染VSMC,用RT-PCR法檢測轉染的VSMC中tPA和VEGF165 mRNA的錶達,用ELISA法檢測轉染的VSMC培養液中tPA和VEGF165蛋白質.結果人tPA和VEGF165基因的RT-PCR產物分彆為1.9kb和576 bp.經酶切鑒定證實,tPA和VEGF165基因已剋隆至真覈錶達質粒pBudCE4.1中.以其轉染VSMC後,經RT-PCR和ELISA檢測髮現,tPA和VEGF165在mRNA和蛋白質水平均有錶達.結論成功地構建瞭真覈共錶達質粒pBudCE4.1/tPA-VEGF165,併在VSMC中錶達tPA和VEGF165.
목적구건휴대인조직섬용매원격활물(tPA)화혈관내피세포생장인자165(VEGF165)기인적진핵표체질립pBudCE4.1/tPA-VEGF165,병관찰기재혈관평활기세포(VSMC)중적표체.방법종인심장조직중극륭tPA화VEGF165기인.장tPA화VEGF165기인극륭지진핵표체질립pBudCE4.1중,구건공표체질립pBudCE4.1/tPA-VEGF165.장pBudCE4.1/tPA-VEGF165전염VSMC,용RT-PCR법검측전염적VSMC중tPA화VEGF165 mRNA적표체,용ELISA법검측전염적VSMC배양액중tPA화VEGF165단백질.결과인tPA화VEGF165기인적RT-PCR산물분별위1.9kb화576 bp.경매절감정증실,tPA화VEGF165기인이극륭지진핵표체질립pBudCE4.1중.이기전염VSMC후,경RT-PCR화ELISA검측발현,tPA화VEGF165재mRNA화단백질수평균유표체.결론성공지구건료진핵공표체질립pBudCE4.1/tPA-VEGF165,병재VSMC중표체tPA화VEGF165.
