病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2006年
1期
44-49
,共6页
陈瑛炜%罗文新%王明桥%王晋%李利峰%袁权%张军%夏宁邵
陳瑛煒%囉文新%王明橋%王晉%李利峰%袁權%張軍%夏寧邵
진영위%라문신%왕명교%왕진%리리봉%원권%장군%하저소
噬菌体抗体库%固定化金属亲和层析%液相筛选
噬菌體抗體庫%固定化金屬親和層析%液相篩選
서균체항체고%고정화금속친화층석%액상사선
本研究报道一种基于固定化金属亲和层析(IMAC)的噬菌体抗体库液相筛选方法.将纯化的带有His标签的抗原与噬菌体抗体库混合,噬菌体抗体与抗原充分结合后再加入亲和介质,使噬菌体抗体抗原复合物通过His标签与介质结合,然后通过充分洗涤去除非特异性噬菌体抗体,最后将特异性噬菌体抗体洗脱下来,感染TG1,进行下一轮筛选.整个筛选过程中抗原与抗体的结合在液相中完成,不仅消除了固相介质对抗原表位的影响,也更有利于噬菌体抗体与抗原的充分作用.将此方法应用于HEV NE2蛋白特异性人源噬菌体抗体的筛选,抗原竞争ELISA,阳性血清阻断,可溶性单链抗体表达检测及测序结果表明,最终获得2个特异性人源抗体.
本研究報道一種基于固定化金屬親和層析(IMAC)的噬菌體抗體庫液相篩選方法.將純化的帶有His標籤的抗原與噬菌體抗體庫混閤,噬菌體抗體與抗原充分結閤後再加入親和介質,使噬菌體抗體抗原複閤物通過His標籤與介質結閤,然後通過充分洗滌去除非特異性噬菌體抗體,最後將特異性噬菌體抗體洗脫下來,感染TG1,進行下一輪篩選.整箇篩選過程中抗原與抗體的結閤在液相中完成,不僅消除瞭固相介質對抗原錶位的影響,也更有利于噬菌體抗體與抗原的充分作用.將此方法應用于HEV NE2蛋白特異性人源噬菌體抗體的篩選,抗原競爭ELISA,暘性血清阻斷,可溶性單鏈抗體錶達檢測及測序結果錶明,最終穫得2箇特異性人源抗體.
본연구보도일충기우고정화금속친화층석(IMAC)적서균체항체고액상사선방법.장순화적대유His표첨적항원여서균체항체고혼합,서균체항체여항원충분결합후재가입친화개질,사서균체항체항원복합물통과His표첨여개질결합,연후통과충분세조거제비특이성서균체항체,최후장특이성서균체항체세탈하래,감염TG1,진행하일륜사선.정개사선과정중항원여항체적결합재액상중완성,불부소제료고상개질대항원표위적영향,야경유리우서균체항체여항원적충분작용.장차방법응용우HEV NE2단백특이성인원서균체항체적사선,항원경쟁ELISA,양성혈청조단,가용성단련항체표체검측급측서결과표명,최종획득2개특이성인원항체.
