CAJ | 학술논문

目的为了克服灭活口蹄疫病毒疫苗可能存在的传播病毒的潜在危险,构建一种能预防O型口蹄疫病毒感染的VP1表位重组蛋白疫苗.方法采用O型口蹄疫病毒(FMDV)表面VP1蛋白上的B细胞表位肽和T细胞表位肽,以PCR扩增和克隆连接等方法构建VP1表位六聚体重组蛋白(VP1epi)基因,并在大肠杆菌中进行诱导表达,镍亲和层析纯化.用ELISA法检测VP1epi免疫豚鼠血清中抗FMDV抗体的水平.结果构建了一种由FMDV表面VP1中B细胞表位肽重复六次的蛋白质多肽,采用pET28原核表达系统,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达产量约占菌体蛋白的30%左右,经镍亲和层析后获得纯度高于90%的VP1表位重组蛋白.VP1epi免疫的豚鼠血清中含有一定量的抗FMDV抗体.结论VP1epi重组蛋白能诱导机体产生抗O型FMDV的抗体,说明这种重组蛋白可能成为预防O型FMDV感染的基因工程蛋白质疫苗.
목적위료극복멸활구제역병독역묘가능존재적전파병독적잠재위험,구건일충능예방O형구제역병독감염적VP1표위중조단백역묘.방법채용O형구제역병독(FMDV)표면VP1단백상적B세포표위태화T세포표위태,이PCR확증화극륭련접등방법구건VP1표위륙취체중조단백(VP1epi)기인,병재대장간균중진행유도표체,얼친화층석순화.용ELISA법검측VP1epi면역돈서혈청중항FMDV항체적수평.결과구건료일충유FMDV표면VP1중B세포표위태중복륙차적단백질다태,채용pET28원핵표체계통,재대장간균BL21(DE3)중획득료고효표체,표체산량약점균체단백적30%좌우,경얼친화층석후획득순도고우90%적VP1표위중조단백.VP1epi면역적돈서혈청중함유일정량적항FMDV항체.결론VP1epi중조단백능유도궤체산생항O형FMDV적항체,설명저충중조단백가능성위예방O형FMDV감염적기인공정단백질역묘.