紫杆柽柳谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆及功能鉴定
자간정류곡광감태류전이매기인적극륭급공능감정
Cloning and Function Characterization of Glutathione S-transferase Gene from Tamarix androssowii
  • 万方数据
    农业生物技术学报 농업생물기술학보
    JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
    2007年 1期 76-80 ,共5页

    杨平%胡军%王玉成%尹维波%陈宇红%姜静%李集临%胡赞民

    양평%호군%왕옥성%윤유파%진우홍%강정%리집림%호찬민

    紫杆柽柳%谷胱甘肽硫转移酶%基因克隆%原核表达%酶活性检测 紫桿檉柳%穀胱甘肽硫轉移酶%基因剋隆%原覈錶達%酶活性檢測
    자간정류%곡광감태류전이매%기인극륭%원핵표체%매활성검측
    根据GenBank已公布的植物谷胱甘肽硫转移酶基因EST序列设计引物,利用3'和5'RACE方法,获得紫杆柽柳GST基因(TaGST)全长cDNA序列,全长为1 175 bp,开放读码区672 bp,编码224个氨基酸(GenBank accission No.DQ683363).其所编码的蛋白与大豆的GST10同源性为48%.利用pET-28a(+)构建了紫杆柽柳(Tamarix androssowii)GST基因的原核表达载体,转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21进行了原核表达.诱导表达蛋白的SDS-PAGE检测表明,所表达的蛋白分子量约为26kD.初步的酶学活性检测表明,所克隆的基因编码的肽段具有催化GST蛋白通用底物CDNB(1-氯-2,4-二硝基苯)和GSH(还原型谷胱甘肽)反应的活性.
    근거GenBank이공포적식물곡광감태류전이매기인EST서렬설계인물,이용3'화5'RACE방법,획득자간정류GST기인(TaGST)전장cDNA서렬,전장위1 175 bp,개방독마구672 bp,편마224개안기산(GenBank accission No.DQ683363).기소편마적단백여대두적GST10동원성위48%.이용pET-28a(+)구건료자간정류(Tamarix androssowii)GST기인적원핵표체재체,전입대장간균(Escherichia coli)BL21진행료원핵표체.유도표체단백적SDS-PAGE검측표명,소표체적단백분자량약위26kD.초보적매학활성검측표명,소극륭적기인편마적태단구유최화GST단백통용저물CDNB(1-록-2,4-이초기분)화GSH(환원형곡광감태)반응적활성.
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