生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
3期
504-508
,共5页
卞福花%龚雪琴%由翠荣%郑彩霞%曲复宁
卞福花%龔雪琴%由翠榮%鄭綵霞%麯複寧
변복화%공설금%유취영%정채하%곡복저
仙客来%愈伤组织%低温保存%存活率
仙客來%愈傷組織%低溫保存%存活率
선객래%유상조직%저온보존%존활솔
为了避免连续继代造成仙客来愈伤组织的变异,对仙客来愈伤组织进行了超低温冷冻保存研究.以继代后处于对数生长期的愈伤组织为实验材料,首先在含有不同蔗糖浓度的培养基上预培养不同时间,转至不同的冰冻保护剂中直接液氮冷冻或-20℃预冷冻2 h,然后液氮超冷冻保存,37℃水浴迅速解冻,并用相应蔗糖浓度的液体培养基洗涤,以中性红染色测定细胞的存活率,SPSS13.0软件进行统计学分析.结果表明:预培养基中蔗糖浓度,预培养时间、降温方式、冷冻保护剂等对解冻后材料相对存活率存在不同程度的影响,筛选出4%蔗糖浓度预培养3 d、9号保护剂,0℃停留30 min后直接冷冻为超低温保存的最佳方案.通过简单的方法获得了较好的愈伤组织保存效果.
為瞭避免連續繼代造成仙客來愈傷組織的變異,對仙客來愈傷組織進行瞭超低溫冷凍保存研究.以繼代後處于對數生長期的愈傷組織為實驗材料,首先在含有不同蔗糖濃度的培養基上預培養不同時間,轉至不同的冰凍保護劑中直接液氮冷凍或-20℃預冷凍2 h,然後液氮超冷凍保存,37℃水浴迅速解凍,併用相應蔗糖濃度的液體培養基洗滌,以中性紅染色測定細胞的存活率,SPSS13.0軟件進行統計學分析.結果錶明:預培養基中蔗糖濃度,預培養時間、降溫方式、冷凍保護劑等對解凍後材料相對存活率存在不同程度的影響,篩選齣4%蔗糖濃度預培養3 d、9號保護劑,0℃停留30 min後直接冷凍為超低溫保存的最佳方案.通過簡單的方法穫得瞭較好的愈傷組織保存效果.
위료피면련속계대조성선객래유상조직적변이,대선객래유상조직진행료초저온냉동보존연구.이계대후처우대수생장기적유상조직위실험재료,수선재함유불동자당농도적배양기상예배양불동시간,전지불동적빙동보호제중직접액담냉동혹-20℃예냉동2 h,연후액담초냉동보존,37℃수욕신속해동,병용상응자당농도적액체배양기세조,이중성홍염색측정세포적존활솔,SPSS13.0연건진행통계학분석.결과표명:예배양기중자당농도,예배양시간、강온방식、냉동보호제등대해동후재료상대존활솔존재불동정도적영향,사선출4%자당농도예배양3 d、9호보호제,0℃정류30 min후직접냉동위초저온보존적최가방안.통과간단적방법획득료교호적유상조직보존효과.
